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目的 研究不同浓度1,25二羟维生素D3[1,25(OH)2D3]对小鼠成骨细胞增殖分化及维生素D受体(VDR)表达的影响,探讨VDR在成骨细胞增殖分化中的作用.方法 在成骨细胞株MC3T3E1培养液中加人不同浓度的1,25(OH)2D3(10-8、10-9、10-10 mol/L),培养48 h后应用噻唑蓝(MTT)比色法检测其对成骨细胞增殖的影响,采用细胞培养上清中骨钙素(OC)水平分析方法检测1,25(OH)2D3对成骨细胞分化的影响;采用SYBR Green荧光定量PCR方法检测细胞VDR基因mRNA表达,Western blot法检测细胞VDR蛋白水平表达.结果 1.小鼠成骨细胞在1,25(OH)2D3处理48 h后,各实验组(10-8、10-9、10-10 mol/L组)吸光度均低于对照组,差异均有统计学意义(Pa<0.05);2.1,25(OH)2D3处理后,10-8、10-9 mol/L组细胞上清中OC水平均高于对照组(Pa<0.05),而10-10 mol/L组OC水平及VDR基因mRNA表达量与对照组比较差异均无统计学意义(Pa>0.05);3.荧光定量PCR及Western blot结果显示10-8、10-9 mol/L处理组细胞VDR基因mRNA及蛋白表达均显著高于对照组(Pa<0.05),10-10 mol/L组与对照组比较无显著性差异(P>0.05).结论 1,25(OH)2D3可显著抑制成骨细胞增殖、促进成骨细胞分化,且可促进成骨细胞VDR表达,提示VDR信号通路在成骨细胞的增殖分化中可能起一定作用.

来源:实用儿科临床杂志 2009 年 24卷 19期

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来源:
实用儿科临床杂志 2009 年 24卷 19期
标签:
1,25二羟维生素D3 成骨细胞 细胞分化 维生素D受体
目的 研究不同浓度1,25二羟维生素D3[1,25(OH)2D3]对小鼠成骨细胞增殖分化及维生素D受体(VDR)表达的影响,探讨VDR在成骨细胞增殖分化中的作用.方法 在成骨细胞株MC3T3E1培养液中加人不同浓度的1,25(OH)2D3(10-8、10-9、10-10 mol/L),培养48 h后应用噻唑蓝(MTT)比色法检测其对成骨细胞增殖的影响,采用细胞培养上清中骨钙素(OC)水平分析方法检测1,25(OH)2D3对成骨细胞分化的影响;采用SYBR Green荧光定量PCR方法检测细胞VDR基因mRNA表达,Western blot法检测细胞VDR蛋白水平表达.结果 1.小鼠成骨细胞在1,25(OH)2D3处理48 h后,各实验组(10-8、10-9、10-10 mol/L组)吸光度均低于对照组,差异均有统计学意义(Pa<0.05);2.1,25(OH)2D3处理后,10-8、10-9 mol/L组细胞上清中OC水平均高于对照组(Pa<0.05),而10-10 mol/L组OC水平及VDR基因mRNA表达量与对照组比较差异均无统计学意义(Pa>0.05);3.荧光定量PCR及Western blot结果显示10-8、10-9 mol/L处理组细胞VDR基因mRNA及蛋白表达均显著高于对照组(Pa<0.05),10-10 mol/L组与对照组比较无显著性差异(P>0.05).结论 1,25(OH)2D3可显著抑制成骨细胞增殖、促进成骨细胞分化,且可促进成骨细胞VDR表达,提示VDR信号通路在成骨细胞的增殖分化中可能起一定作用.