目的 探讨在斑马鱼胚胎发育中外源性视黄酸(RA)是否能逆转乙醇的毒性.方法 采用原位杂交方法检测乙醇和RA共同处理、二者单独处理斑马鱼胚胎后nkx2.5基因的表达及DEAB(视黄醛脱氢酶的抑制剂)与乙醇共同处理及单独处理后nkx2.5基因的表达.采用RT-PER的方法检测gata5、gata6、raldh2基因的表达,并检测raldh2基因敲除后gata5、gata6的表达变化.结果 将RA和乙醇共同处理斑马鱼胚胎后,胚胎发育畸形更加明显,在受精后24 h(24 hpf)nkx2.5的原位杂交结果显示双侧心脏原基不能融合成单个原始心管;乙醇单独处理胚胎影响心脏的环化过程,且nkx2.5的表达上调;乙醇与RA共同处理后,gata5、gam6及raldh2的表达较正常对照组轻微上调,但差异无统计学意义,而敲除raldh2基因后,gata5、gata6的表达有显著下调;DEAB处理胚胎后,原始心管融合正常;300 mmol·L-1乙醇处理后,心脏原基不能融合成原始心管,与200 mmol·L-1乙醇及RA共同处理的表型相似.结论 RA和乙醇共同处理后,通过影响原始心管融合而加重心脏发育的畸形,这种现象可能是因为乙醇代谢率降低,加重了乙醇的毒性,并不是由于影响了gata5、gata6的表达;乙醇通过影响nkx2.5基因的表达,而使心脏环化发生异常;fLA信号能调节gata5和gata6的表达.
作者：龚春华；李爱国；赵庆顺；王大为；李军
来源：实用儿科临床杂志 2010 年 25卷 1期
