目的 探讨混合培养的人脐血间充质干细胞(MSCs)对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠的疗效.方法 无菌条件下收集20份健康足月新生儿脐血,采用密度梯度离心法分离出脐血单个核细胞,再通过贴壁细胞培养法培养出人脐血MSCs.当细胞传至第3代时,随机取培养的8份脐血MSCs(半量)为A组,8份脐血MSCs(半量)为B组,将A、B组剩余的半量脐血MSCs混合为C组,3组细胞密度均为1×106L-1.混合培养的第3代脐血MSCs用流式细胞仪检测细胞表面抗原CD29、CD34、CD44、CD105的表达.选择P4代人脐血MSCs作为移植细胞,并经5-溴-2-尿嘧啶脱氧核苷(BrdU)体外标记.7日龄SD大鼠45只制备HIBD模型,造模中死亡3只,余42只分为混合移植组(n=16)、单份移植组(n=16)和对照组(n=10).造模第3天,在立体定化条件下,移植组大鼠经左侧脑皮质注入人脐血 MSCs,对照组在相同部位注入相同体积的PBS.在细胞移植第7天,随机选择6只移植组大鼠处死取脑,采用免疫组织化学方法观察移植细胞在脑内的存活、迁移和分化情况.移植第1、7、14、21、28天采用改良神经功能损害评分(mNSS)对3组大鼠的神经功能进行评价.结果 活细胞计数显示,C组细胞增殖较A组、B组快(Pa<0.05).移植组大鼠脑组织免疫组织化学检测发现移植细胞在脑内能够存活,并以移植点为中心向周围迁移;混合移
作者：李湘云；胡博；李建斌；单泓；赵林娜；段艳丽；韩小改；杨鹏辉
来源：实用儿科临床杂志 2010 年 25卷 8期
