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目的 研究高体积分数氧(高氧)对人肺腺癌A549细胞硫氧还蛋白-1(Trx1)及硫氧还蛋白还原酶-1(TrxR1)表达的影响,探讨Trx1及TrxR1在高氧肺损伤中的作用.方法 体外传代培养A549细胞,待其生长至融合状态时随机分为高氧组和空气组.高氧组置于一饱和湿度密封箱中,通以950 mL·L-1氧气(O2)[含50 mL·L-1二氧化碳(CO2)]15 min;空气组置于同一室空气中15 min;2组同时置于37℃含50 mL·L-1 CO2细胞培养箱中,分别于6 h、12 h、24 h提取其A549细胞总RNA和总蛋白.采取半定量反转录(RT)-PCR测定其Trx1 mRNA、TrxR1 mRNA的表达;采用Western blot检测其A54.9细胞Trx1蛋白的表达.结果 1.与空气组比较,A549细胞高氧暴露6 h、12 h时Trx1 mRNA表达显著增强(P=0.012,0.002),24 h时减弱,与空气组比较差异无统计学意义(P=0.795);与空气组比较,高氧暴露6 h TrxR1 mRNA无明显变化(P=0.878);12 h,24 h时TrxR1 mBNA表达明显增强(P=0.003,0.001).2.与空气组比较,高氧暴露6h Trx1蛋白有所增加但差异无统计学意义(P=0.575);12 h、24 h时Trx1蛋白表达均显著增强(P=0.003,0.026).结论 高氧暴露可上调A549细胞中Trx1及TrxR1的表达,提示内源性的Trx1及TrxR1在高氧肺损伤机制中提供了保护作用.

作者:单瑞艳;常立文;李文斌;刘伟;陈燕;曾凌空;徐洪涛;周玉容;张佳

来源:实用儿科临床杂志 2010 年 25卷 20期

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作者:
单瑞艳;常立文;李文斌;刘伟;陈燕;曾凌空;徐洪涛;周玉容;张佳
来源:
实用儿科临床杂志 2010 年 25卷 20期
标签:
高体积分数氧 A549细胞 肺损伤 硫氧还蛋白-1 硫氧还蛋白还原酶-1
目的 研究高体积分数氧(高氧)对人肺腺癌A549细胞硫氧还蛋白-1(Trx1)及硫氧还蛋白还原酶-1(TrxR1)表达的影响,探讨Trx1及TrxR1在高氧肺损伤中的作用.方法 体外传代培养A549细胞,待其生长至融合状态时随机分为高氧组和空气组.高氧组置于一饱和湿度密封箱中,通以950 mL·L-1氧气(O2)[含50 mL·L-1二氧化碳(CO2)]15 min;空气组置于同一室空气中15 min;2组同时置于37℃含50 mL·L-1 CO2细胞培养箱中,分别于6 h、12 h、24 h提取其A549细胞总RNA和总蛋白.采取半定量反转录(RT)-PCR测定其Trx1 mRNA、TrxR1 mRNA的表达;采用Western blot检测其A54.9细胞Trx1蛋白的表达.结果 1.与空气组比较,A549细胞高氧暴露6 h、12 h时Trx1 mRNA表达显著增强(P=0.012,0.002),24 h时减弱,与空气组比较差异无统计学意义(P=0.795);与空气组比较,高氧暴露6 h TrxR1 mRNA无明显变化(P=0.878);12 h,24 h时TrxR1 mBNA表达明显增强(P=0.003,0.001).2.与空气组比较,高氧暴露6h Trx1蛋白有所增加但差异无统计学意义(P=0.575);12 h、24 h时Trx1蛋白表达均显著增强(P=0.003,0.026).结论 高氧暴露可上调A549细胞中Trx1及TrxR1的表达,提示内源性的Trx1及TrxR1在高氧肺损伤机制中提供了保护作用.