目的 研究血管内皮生长因子(VEGF)基因转染骨髓间充质干细胞(MSCs)移植对支气管肺发育不良大鼠肺泡结构和肺部微血管的作用.方法 采用密度梯度离心法分离SD大鼠骨髓MSCs,贴壁培养传代并鉴定,应用DNA重组技术构建真核表达载体pcDNA3.1(-)/VEGF164,然后转染至MSCs.将新生SD大鼠置于950 mL/L氧箱中14 d后,随机分为转染组(MSCs/VEGF组)、对照组(MSCs组)、空白组(无血清培养基组),每组10只,分别于气管内注入1×105个转染VEGF的MSCs、单纯MSCs和等量无血清培养基.分别于移植后1、4周取大鼠肺组织行HE染色观察肺组织结构和放射状肺泡计数(RAC),免疫组织化学染色法评价VEGF蛋白表达和新生血管密度情况,Western blot方法检测肺组织中VEGF164蛋白表达情况.结果 免疫组织化学结果显示移植后l、4周转染组大鼠肺组织RAC、VEGF蛋白表达、再生血管密度较对照组和空白组均明显增加(P均＜0.05).Western blot检测结果显示移植后1、4周转染组VEGF164蛋白表达较对照组和空白组均明显增加(P均＜0.05).结论 VEGF基因转染MSCs移植能显著促进肺泡发育以及微血管再生,VEGF与新生大鼠肺发育有密切关系.
作者：王斌；刘茹；陈春芳；钟春霞；李秋平；杜江
来源：中华实用儿科临床杂志 2013 年 28卷 2期
