目的:研究硫化氢(H2 S)对低密度脂蛋白受体(LDLR)的调节作用及意义。方法小鼠原代肝细胞分为对照组、低密度脂蛋白(LDL)组以及 LDL +硫氢化钠(NaHS,H2 S 供体)组。LDL 组及 LDL +NaHS 组细胞给予 LDL(50 mg/L),LDL +NaHS 组细胞在给予 LDL 处理前先予 NaHS(100μmol/L)预处理0.5 h。应用Real-time PCR 和 Western blot 分别检测小鼠原代肝细胞 LDLR mRNA 和蛋白的表达。将培养的小鼠原代肝细胞分为对照组、1,1′-双十八烷基-3,3,3′,3′-四甲基吲哚羰花青高氯酸(DiI)标记的 LDL 组及 DiI-LDL +NaHS组。DiI-LDL 组细胞予 DiI-LDL(10 mg/L)孵育3 h,DiI-LDL +NaHS 组细胞先予 NaHS(100μmol/L)孵育1 h,然后再加入 DiI-LDL(10 mg/L)孵育3 h,采用激光共聚焦法检测小鼠原代肝细胞对 DiI-LDL 的摄取,应用荧光定量法分析细胞培养上清中 DiI-LDL 的水平。结果与对照组相比,LDL 组小鼠原代肝细胞 LDLR mRNA 和蛋白表达均明显降低(t =5.733,P <0.01;t =2.527,P <0.05);与 LDL 组相比,LDL +NaHS 组小鼠原代肝细胞LDLR mRNA 和蛋白表达均明显升高(t =-7.639,P <0.01;t =2.388,P <0.05)。给予细胞 DiI-LDL 后,可以观察到细胞对 DiI-LDL 的
作者:王圆;金红芳;杜军保
来源:中华实用儿科临床杂志 2016 年 31卷 13期