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目的 探讨胰岛素(INS)对脓毒症大鼠脑组织的保护作用及机制,分析解偶联蛋白2(UCP2)在其中的可能作用.方法 50只无特定病原体(SPF)级SD雄性大鼠,按随机数字表法分为正常对照组(CN组,10只)、脂多糖(LPS)组(20只)、INS组(20只).通过腹腔注射革兰阴性菌LPS 15 mg/kg建立脓毒症大鼠模型.INS组在造模前30 min皮下注射长效INS 1 U/kg,LPS组皮下注射等量9 g/L盐水.LPS造模后24 h,每组各取8只处死,留取大脑皮质.苏木精-伊红(HE)染色观察大脑皮质病理改变,提取皮质线粒体测定线粒体活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP 缺口末端标记法检测皮质神经细胞凋亡,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测皮质UCP2 mRNA表达,Western blot检测凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关蛋白(Bax)、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(cleaved Caspase-9)和UCP2蛋白的表达.结果 1.与CN组相比,LPS组和INS组大鼠皮质HE染色可见明显异常病理改变;与LPS组相比,INS组大鼠皮质病理改变减轻.2.与CN组相比,LPS组皮质线粒体ROS[(210.01±14.09) RFU比(49.06±7.28) RFU]和MDA[(2.19±0.18) nmol/mg pro比(1.25±0.11) nmol/mg pro]水平明显升高,SOD活力明显下降[(238.49±35.60) U/g pro

作者:王桃;陈亦婷;张俊亮;陈广道;张炬兴;黄锦达;曾其毅

来源:中华实用儿科临床杂志 2017 年 32卷 11期

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王桃;陈亦婷;张俊亮;陈广道;张炬兴;黄锦达;曾其毅
来源:
中华实用儿科临床杂志 2017 年 32卷 11期
标签:
脓毒症 脑 胰岛素 活性氧 氧化应激 凋亡 解偶联蛋白2 Sepsis Brain Insulin Reactive oxygen species Oxidative stress Apoptosis Uncoupling protein 2
目的 探讨胰岛素(INS)对脓毒症大鼠脑组织的保护作用及机制,分析解偶联蛋白2(UCP2)在其中的可能作用.方法 50只无特定病原体(SPF)级SD雄性大鼠,按随机数字表法分为正常对照组(CN组,10只)、脂多糖(LPS)组(20只)、INS组(20只).通过腹腔注射革兰阴性菌LPS 15 mg/kg建立脓毒症大鼠模型.INS组在造模前30 min皮下注射长效INS 1 U/kg,LPS组皮下注射等量9 g/L盐水.LPS造模后24 h,每组各取8只处死,留取大脑皮质.苏木精-伊红(HE)染色观察大脑皮质病理改变,提取皮质线粒体测定线粒体活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP 缺口末端标记法检测皮质神经细胞凋亡,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测皮质UCP2 mRNA表达,Western blot检测凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关蛋白(Bax)、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(cleaved Caspase-9)和UCP2蛋白的表达.结果 1.与CN组相比,LPS组和INS组大鼠皮质HE染色可见明显异常病理改变;与LPS组相比,INS组大鼠皮质病理改变减轻.2.与CN组相比,LPS组皮质线粒体ROS[(210.01±14.09) RFU比(49.06±7.28) RFU]和MDA[(2.19±0.18) nmol/mg pro比(1.25±0.11) nmol/mg pro]水平明显升高,SOD活力明显下降[(238.49±35.60) U/g pro