目的 观察他克莫司(Tacrolimus,FK506)及嘌呤霉素(Puromycin,PAN)对小鼠肾小球足细胞podocin蛋白表达和分布的影响,探讨FK506保护肾小球足细胞、影响蛋白尿产生的机制.方法 体外培养小鼠肾小球足细胞(MPC5),实验分为对照组、PAN组和FK506组.处理8 h、24 h和48 h后,观察并收集细胞进行实时荧光定量PCR、Western blot检测podocin mRNA及蛋白的表达,免疫荧光染色检测podocin蛋白的分布.结果 PAN组在8 h、24 h、48 h时胞体面积(6.41 ± 0.22、4.96 ± 0.09、3.76 ± 0.16)较对照组(8.54 ± 0.25、8.27 ± 0.07、7.45 ± 0.13)缩小.FK506组各时间点足细胞胞体面积(7.67 ± 0.06、6.62 ± 0.04、5.57 ± 0.27)较PAN组增大.PAN组在8 h、24 h、48 h荧光定量PCR(0.63 ± 0.12、0.56 ± 0.01、0.48 ± 0.02)、Western blot (0.71 ± 0.03、0.46 ± 0.01、0.34 ± 0.02)及免疫荧光染色结果显示podocin mRNA表达量(1.22 ± 0.15、1.18 ± 0.06、0.87 ± 0.30)较对照组下降,蛋白表达量(0.86 ± 0.03、0.87 ± 0.03、0.61 ± 0.07)降低且分布异常,随着时间的延长mRNA和蛋白表达量明显降低(均P<0.05),分布明显异常.FK506组在8 h、24 h、48 h时podocin mRNA(0.87 ± 0.15、0.78 ± 0.15、0.58 ± 0.12)及蛋白(0.82 ± 0.0

作者：谢清科；于力于；生友；郝志宏

来源：中华实用儿科临床杂志 2018 年 33卷 5期