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目的:探讨活性氧(ROS)对卵巢上皮性癌细胞株SKOV3细胞的间充质转化的影响及其中可能存在的分子机制.方法:①通过采用ROS生成剂大黄素(Emodin)、ROS清除剂二硫苏糖醇(DTT)调节卵巢上皮性癌细胞株SKOV3细胞内ROS水平,采用PCR技术及蛋白印迹法测定3组(Emodin组、DTT组、对照组)细胞中间充质转化标志分子E钙黏蛋白(E-cadherin) mRNA及蛋白的表达,比较细胞株侵袭转移能力.②结合改变活性氧水平,构建缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的化学合成,小干扰RNA(SiRNA)沉默HIF-1α表达(HIF-1α SiRNA组、DTT组、对照组),比较HIF-1αmRNA的表达.③使用赖氨酰氧化酶(LOX)抑制剂β-氨基丙腈(β-APN)抑制LOX表达,观察各组(Emodin组、DTT组、β-APN组、Emodin+ β-APN组、对照组)细胞HIF-1α、LOX、E-cadherin mRNA及蛋白表达.结果:①SKOV3细胞Emodin组ROS水平较对照组明显升高[(164.85±8.93)%vs(97.42±6.47)%,P<0.01,E-cadherin mRNA及蛋白的表达均较对照组显著降低(P<0.05),Emodin组的细胞侵袭率高于对照组[(19.48 ±0.49)% vs(10.74±2.38)%,P<0.01],而DTT组结果与之相反,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).②HIF-1α SiRNA作用下,HIF-1αSiRNA组的HIF-1αmRNA表达较对照组降低(0.20 ±0.09 vs 0.87 ±0.10,P<

作者:王诚洁;马骏;孙岳平;王育

来源:实用妇产科杂志 2015 年 31卷 2期

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作者:
王诚洁;马骏;孙岳平;王育
来源:
实用妇产科杂志 2015 年 31卷 2期
标签:
活性氧 卵巢上皮性癌 SKOV3细胞 间充质转化 E钙黏蛋白 Reactive Oxygen Species Epithelial ovarian cancer SKOV3 cells Epithelial-mesenchymal transition E-cadherin
目的:探讨活性氧(ROS)对卵巢上皮性癌细胞株SKOV3细胞的间充质转化的影响及其中可能存在的分子机制.方法:①通过采用ROS生成剂大黄素(Emodin)、ROS清除剂二硫苏糖醇(DTT)调节卵巢上皮性癌细胞株SKOV3细胞内ROS水平,采用PCR技术及蛋白印迹法测定3组(Emodin组、DTT组、对照组)细胞中间充质转化标志分子E钙黏蛋白(E-cadherin) mRNA及蛋白的表达,比较细胞株侵袭转移能力.②结合改变活性氧水平,构建缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的化学合成,小干扰RNA(SiRNA)沉默HIF-1α表达(HIF-1α SiRNA组、DTT组、对照组),比较HIF-1αmRNA的表达.③使用赖氨酰氧化酶(LOX)抑制剂β-氨基丙腈(β-APN)抑制LOX表达,观察各组(Emodin组、DTT组、β-APN组、Emodin+ β-APN组、对照组)细胞HIF-1α、LOX、E-cadherin mRNA及蛋白表达.结果:①SKOV3细胞Emodin组ROS水平较对照组明显升高[(164.85±8.93)%vs(97.42±6.47)%,P<0.01,E-cadherin mRNA及蛋白的表达均较对照组显著降低(P<0.05),Emodin组的细胞侵袭率高于对照组[(19.48 ±0.49)% vs(10.74±2.38)%,P<0.01],而DTT组结果与之相反,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).②HIF-1α SiRNA作用下,HIF-1αSiRNA组的HIF-1αmRNA表达较对照组降低(0.20 ±0.09 vs 0.87 ±0.10,P<