目的观察针对HBV(乙型肝炎病毒)C区双位点核酶在细胞内阻断C区基因表达的作用.方法采用亚克隆技术,从pGEM-Rz123(含针对HBV C区双位点核酶)上切下双位点核酶的片段,定向克隆于腺病毒表达载体pAd-CMV中.利用Lipofectamine2000介导,将重组病毒pAdCMV-Rz及pAdCMV-laz感染2.2.15细胞中,采用打点杂交技术观察核酶的表达,采用ELISA(酶联免疫)、免疫荧光、共聚焦定量、图象分析法、Western blot分析Hbe/HBcAg的表达.结果感染的2.2.15细胞2周后,打点杂交证实可表达针对HBV C区双位点核酶.ELISA方法检测发现核酶抑制HBeAg表达68.6
作者:李谨革;贾建新;周永兴;连建奇;贾战生;冯志华;郝从容
来源:实用肝脏病杂志 2003 年 6卷 1期