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目的 研究人瘢痕疙瘩间充质样干细胞向成骨细胞分化过程中,Notch 1 ~4受体的表达情况,探讨Notch信号通路是否参与调控人瘢痕疙瘩间充质样干细胞的成骨分化.方法 经患者知情同意后,分离培养人瘢痕疙瘩间充质样干细胞,采用流式细胞术检测CD29、CD34、CD44、CD45及CD90的表达;免疫细胞化学法检测Oct 4的表达;体外诱导其向成骨细胞分化,诱导3周后行茜素红染色;于诱导前及诱导后2、3周,采用实时定量-多聚酶链反应(RT-PCR)及免疫蛋白印迹法(westernblot),分别检测细胞Notch 1 ~4受体mRNA及蛋白的表达.结果 流式细胞术结果表明,分离培养的细胞高表达间充质干细胞表型CD29(98.76%)、CD44(98.11%)、CD90(97.86%),不表达造血干细胞表型CD34(0.05%)、CD45(0.03%);免疫细胞化学法检测多能干细胞标志物Oct 4呈阳性表达;向成骨细胞体外诱导3周后,茜素红染色可见明显的钙盐结节.RT-PCR和westem blot结果显示,随着诱导时间的延长,Notch1 ~4受体mRNA和蛋白的相对表达量逐渐减少,差异有统计学意义(P<0.05).结论 在人瘢痕疙瘩间充质样干细胞向成骨细胞诱导分化过程中,Notch受体信号的表达逐渐减弱,低水平的Notch信号激活可能有利于瘢痕疙瘩间充质样干细胞的成骨分化.

作者:梁钦博;邓呈亮;魏在荣;王波;张文夺;王达利

来源:中国美容整形外科杂志 2017 年 28卷 2期

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作者:
梁钦博;邓呈亮;魏在荣;王波;张文夺;王达利
来源:
中国美容整形外科杂志 2017 年 28卷 2期
标签:
瘢痕疙瘩 间充质干细胞 Notch信号通路 成骨分化 Keloid Mesenchymal stem cells Notch signaling pathway Osteogenic differentiation
目的 研究人瘢痕疙瘩间充质样干细胞向成骨细胞分化过程中,Notch 1 ~4受体的表达情况,探讨Notch信号通路是否参与调控人瘢痕疙瘩间充质样干细胞的成骨分化.方法 经患者知情同意后,分离培养人瘢痕疙瘩间充质样干细胞,采用流式细胞术检测CD29、CD34、CD44、CD45及CD90的表达;免疫细胞化学法检测Oct 4的表达;体外诱导其向成骨细胞分化,诱导3周后行茜素红染色;于诱导前及诱导后2、3周,采用实时定量-多聚酶链反应(RT-PCR)及免疫蛋白印迹法(westernblot),分别检测细胞Notch 1 ~4受体mRNA及蛋白的表达.结果 流式细胞术结果表明,分离培养的细胞高表达间充质干细胞表型CD29(98.76%)、CD44(98.11%)、CD90(97.86%),不表达造血干细胞表型CD34(0.05%)、CD45(0.03%);免疫细胞化学法检测多能干细胞标志物Oct 4呈阳性表达;向成骨细胞体外诱导3周后,茜素红染色可见明显的钙盐结节.RT-PCR和westem blot结果显示,随着诱导时间的延长,Notch1 ~4受体mRNA和蛋白的相对表达量逐渐减少,差异有统计学意义(P<0.05).结论 在人瘢痕疙瘩间充质样干细胞向成骨细胞诱导分化过程中,Notch受体信号的表达逐渐减弱,低水平的Notch信号激活可能有利于瘢痕疙瘩间充质样干细胞的成骨分化.