目的 研究Nrf2基因对中波紫外线(UVB)诱导人永生化角质形成细胞(HaCaT)光损伤的保护作用.方法 将培养的HaCaT细胞分为正常组、UVB组、Si-RNA组(Nrf2基因沉默组)和Si-RNA组+UVB组.以30 J/cm2剂量的UVB照射细胞,观察Nrf2基因沉默后的HaCaT细胞经UVB照射后细胞形态的变化,用CCK-8方法检测细胞生存率,用流式细胞仪定量ROS检测,免疫印迹试验(Western-blot)检测Nrf2蛋白的表达情况.结果 CCK-8法检测结果显示,UVB组与正常组比较,细胞生存率降低;在Nrf2基因沉默后,HaCaT经UVB照射后细胞活力降低程度更显著,与UVB组比较,P<0.05.流式细胞仪检测Nrf2基因沉默后,HaCaT的ROS水平增加,其中SiRNA+UVB组ROS与SiRNA组和UVB组比较增加幅度更明显.Western-blot显示UVB组Nfr2蛋白表达较正常组降低(P<0.01),SiRNA组和SiRNA+UVB组的Nfr2蛋白表达显著降低,基因沉默表达,其中SiRNA+UVB组较SiRNA组,Nrf2蛋白表达降低(P<0.01).结论 Nrf2基因沉默后,UVB诱导HaCaT细胞的氧化损伤和凋亡明显增加,表明Nrf2基因具有显著的光保护功效,其作用机制与增强细胞抗氧化能力、加速清除氧自由基有关.
作者：任静；马良娟
来源：实用皮肤病学杂志 2020 年 13卷 3期
