本课题研究羊栖菜多糖(Sargassum Fusiforme Polysaccharides,SFPS)诱导人大肠癌lovo细胞凋亡及凋亡过程中Caspase-3的变化及其意义.MTT法检测SFPS对大肠癌细胞增殖的抑制率;通过电镜、琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术鉴定细胞凋亡;应用Western blot法测定Caspase-3酶原的变化;RT-PCR检测Caspase-3 mRNA表达.结果显示:SFPS作用lovo细胞24,36,48和72 h的IC50分别为375,355,178和60 mg/L,表明对lovo细胞具有显著生长抑制作用.在电镜下,可见明显的细胞凋亡特征:细胞膜表面微绒毛减少、染色质固缩、边集,凋亡小体形成.在琼脂糖凝胶电泳中,药物浓度为5-300 mg/L作用24 h后,显示有凋亡细胞特有的DNA梯状条带;而500 mg/L处理后梯状条带模糊,开始出现"涂片状",表明在高药物浓度的作用下,细胞有坏死.流式细胞仪测得细胞凋亡率有剂量的依赖性;DNA直方图出现亚G1峰,但细胞周期时相的分布无明显改变.SFPS处理lovo细胞后,发现Caspase-3酶原蛋白表达降低,Caspase-3的mRNA高表达,并具有剂量和时间的依赖性.实验结果提示,SFPS在体外能够诱导lovo细胞凋亡,这可能是SFPS抑制肿瘤增殖的机制之一,而Caspase-3的活化参与了SFPS诱导lovo细胞凋亡的调控.
作者：严璘璘；梁倩；李继承
来源：实验生物学报 2005 年 38卷 5期
