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目的 通过动物实验和细胞实验分析SIRT6增加动脉粥样硬化斑块稳定性的机制.方法 本实验时间为2019年12月至2021年12月.动物实验:将10只雄性C57BL小鼠作为空白对照组;将20只雄性ApoE-/-小鼠随机分为动脉粥样硬化组和动脉粥样硬化+SIRT6 Tg组,每组10只.采用高脂饲料喂养动脉粥样硬化组和动脉粥样硬化+SIRT6 Tg组小鼠16周以构建动脉粥样硬化小鼠模型.其中动脉粥样硬化+SIRT6 Tg组通过尾静脉注射200μl滴度为1×109 eg/ml的腺相关病毒(AAV)-SIRT6,共注射3次,在1周内完成注射,以过表达SIRT6.干预16周后,采用HE染色检测各组小鼠动脉粥样硬化斑块面积,Masson染色检测各组小鼠动脉粥样硬化斑块中胶原含量,免疫组化染色检测各组小鼠动脉粥样硬化斑块中CD68表达水平.细胞实验:取对数生长期的巨噬细胞,将其分为空白对照组、氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)组(采用50μg/ml的ox-LDL干预24 h)、ox-LDL+Ad-SIRT6组(转导腺病毒Ad-SIRT624 h,用50μg/ml的ox-LDL干预24 h);采用Western blotting法检测各组巨噬细胞中SIRT6、CD36表达水平.取对数生长期的巨噬细胞,将其分为空白对照组、ox-LDL组(采用50μg/ml的ox-LDL干预24 h)、ox-LDL+Ad-SIRT6组(转导腺病毒Ad-SIRT624 h,用50μg/ml的ox-LDL干预24 h)、ox-LDL+Ad-SIRT6+Ad-CD36组

作者:王婷婷;李妍;张明明;蒋国健;张东伟

来源:实用心脑肺血管病杂志 2022 年 30卷 4期

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作者:
王婷婷;李妍;张明明;蒋国健;张东伟
来源:
实用心脑肺血管病杂志 2022 年 30卷 4期
标签:
动脉粥样硬化;斑块,动脉粥样硬化;SIRT6;CD36;巨噬细胞
目的 通过动物实验和细胞实验分析SIRT6增加动脉粥样硬化斑块稳定性的机制.方法 本实验时间为2019年12月至2021年12月.动物实验:将10只雄性C57BL小鼠作为空白对照组;将20只雄性ApoE-/-小鼠随机分为动脉粥样硬化组和动脉粥样硬化+SIRT6 Tg组,每组10只.采用高脂饲料喂养动脉粥样硬化组和动脉粥样硬化+SIRT6 Tg组小鼠16周以构建动脉粥样硬化小鼠模型.其中动脉粥样硬化+SIRT6 Tg组通过尾静脉注射200μl滴度为1×109 eg/ml的腺相关病毒(AAV)-SIRT6,共注射3次,在1周内完成注射,以过表达SIRT6.干预16周后,采用HE染色检测各组小鼠动脉粥样硬化斑块面积,Masson染色检测各组小鼠动脉粥样硬化斑块中胶原含量,免疫组化染色检测各组小鼠动脉粥样硬化斑块中CD68表达水平.细胞实验:取对数生长期的巨噬细胞,将其分为空白对照组、氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)组(采用50μg/ml的ox-LDL干预24 h)、ox-LDL+Ad-SIRT6组(转导腺病毒Ad-SIRT624 h,用50μg/ml的ox-LDL干预24 h);采用Western blotting法检测各组巨噬细胞中SIRT6、CD36表达水平.取对数生长期的巨噬细胞,将其分为空白对照组、ox-LDL组(采用50μg/ml的ox-LDL干预24 h)、ox-LDL+Ad-SIRT6组(转导腺病毒Ad-SIRT624 h,用50μg/ml的ox-LDL干预24 h)、ox-LDL+Ad-SIRT6+Ad-CD36组