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目的 观察亚硝基化在锰致蛋白二巯基异构酶活性改变中的作用. 方法 以胎大鼠脑片为模型,实验分4组,分别为对照组,正常DMEM培养液;锰处理组,含400 μM锰的DMEM培养液;低剂量L-刀豆氨酸硫酸盐(L-Can)预处理组,用0.5 mML-刀豆氨酸硫酸盐预处理脑片12 h后,再用含400μM锰的DMEM培养液;高剂量L-刀豆氨酸硫酸盐预处理组,用2mML-刀豆氨酸硫酸盐预处理脑片12 h后,再用含400μM锰的DMEM培养液.37℃孵育24 h.检测下列指标:蛋白二巯基异构酶(PDI)蛋白活性,PDI的基因和蛋白表达,以及PDI亚硝基化情况,NO生成量、诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)活性. 结果 锰可活化iNOS,使细胞内PDI亚硝基化水平升高,降低PDI正常活性.L-刀豆氨酸硫酸盐可抑制神经细胞损伤后iNOS的活性、降低NO的生成量,降低PDI蛋白亚硝基化水平. 结论 锰诱导iNOS活化,造成神经细胞内PDI蛋白亚硝基化,影响其正常功能;L-Can可以减轻锰所致的PDI蛋白亚硝基化水平,对锰致神经细胞损伤起到保护作用.

作者:王璨;关露超;邓宇;宋奇繁;刘巍;徐兆发;徐斌

来源:实用预防医学 2015 年 22卷 10期

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作者:
王璨;关露超;邓宇;宋奇繁;刘巍;徐兆发;徐斌
来源:
实用预防医学 2015 年 22卷 10期
标签:
锰 蛋白二巯基异构酶 亚硝基化 脑片培养 Manganese Protein-disulphide isomerase Nitrosylation Brain slice culture
目的 观察亚硝基化在锰致蛋白二巯基异构酶活性改变中的作用. 方法 以胎大鼠脑片为模型,实验分4组,分别为对照组,正常DMEM培养液;锰处理组,含400 μM锰的DMEM培养液;低剂量L-刀豆氨酸硫酸盐(L-Can)预处理组,用0.5 mML-刀豆氨酸硫酸盐预处理脑片12 h后,再用含400μM锰的DMEM培养液;高剂量L-刀豆氨酸硫酸盐预处理组,用2mML-刀豆氨酸硫酸盐预处理脑片12 h后,再用含400μM锰的DMEM培养液.37℃孵育24 h.检测下列指标:蛋白二巯基异构酶(PDI)蛋白活性,PDI的基因和蛋白表达,以及PDI亚硝基化情况,NO生成量、诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)活性. 结果 锰可活化iNOS,使细胞内PDI亚硝基化水平升高,降低PDI正常活性.L-刀豆氨酸硫酸盐可抑制神经细胞损伤后iNOS的活性、降低NO的生成量,降低PDI蛋白亚硝基化水平. 结论 锰诱导iNOS活化,造成神经细胞内PDI蛋白亚硝基化,影响其正常功能;L-Can可以减轻锰所致的PDI蛋白亚硝基化水平,对锰致神经细胞损伤起到保护作用.