目的 构建大鼠酸感受离子通道亚基2a(acid-sensing ion channel subunit 2a,ASIC2a)的表达质粒并研究其组成的同聚体离子通道的生物学特性.方法 使用分子生物学技术构建大鼠ASIC2a亚基表达质粒;通过体外转录技术,使编码ASIC2a亚基的cRNA在爪蟾卵母细胞内表达并在膜表面形成同聚体离子通道;使用双电极电压钳技术研究ASIC2a的生物学特性.结果 在注射ASIC2a亚基cRNA的爪蟾卵母细胞上,降低胞外液pH值可诱导出内向电流.H+诱发的ASIC2a内向电流具有稳态失活成分可被氨氯吡咪可逆性阻断,其pH50为5.12.提高胞外Ca2+浓度可降低H+诱发的电流幅度,其IC50为11.98 mmol·L-1.当细胞外液中无Na+时,H+基本上不能诱发出内向电流;当同时去除细胞外液中Na+和K+时,H+可诱发出外向电流.结论 成功构建ASIC2a表达质粒;ASIC2a除了对Na+通透外,对K+也有一定的通透性,胞外Ca2+抑制ASIC2a孔道的开放.
作者:戴薇薇;刘晓燕;马晓芸;张树卓;张景海;郑建全
来源:沈阳药科大学学报 2008 年 25卷 2期