目的:构建表达人O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)基因重组腺病毒载体.方法:提取人肝组织总RNA,利用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)克隆人肝细胞MGMT基因,将PCR产物连接入pBS-T原核载体,阳性重组子以双酶切及PCR鉴定.将目的基因MGMT片段亚克隆至腺病毒质粒pacAd5 CMVmcsIRES eGFP pA.构建重组腺病毒载体pacAd5 CMVmcs IRES eGFP pA-MGMT.结果:构建了人MGMT基因的重组腺病毒载体.结论:本研究成功构建了含MGMT基因的重组腺病毒载体,为进一步研究耐药基因MGMT在烷化剂治疗中对真核细胞的保护作用提供了有力的工具.
作者：郭鹏翔；王季石
来源：实用医学杂志 2010 年 26卷 13期
