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目的:探讨 RNA 干扰细胞外信号调节激酶1/2(extracellular signal-regulated kinase 1/2,ERK1/2)基因表达对大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells, VSMCs)增殖的影响。方法:利用脂质体将ERK1/2 siRNA 片段转染入VSMCs,实时荧光定量 RT-PCR 检测 ERK1/2 mRNA 表达水平,Western blotting法检测各组ERK1/2蛋白表达量的变化,MTS法检测细胞的增殖情况。结果:RT-qPCR 结果显示,干预组的ERK1 mRNA 表达量明显下降,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);干预组的 ERK2 mRNA 表达量明显下降,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。Western blotting 结果显示,干预组的ERK1/2蛋白表达相对量明显下降,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。转染24 h、48 h、72 h后,MTS结果显示,干预组细胞的增殖受抑制,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:针对ERK1/2的特异性siRNA能够有效抑制血管平滑肌细胞中的ERK1/2基因表达,并抑制血管平滑肌细胞的增殖。 ERK1/2基因被沉默后,对血管平滑肌细胞的增殖有抑制作用,提示 RNAi 技术沉默 ERK1/2可以作为动脉粥样硬化及血管成形术术后再狭窄防治新的研究方向。

作者:黄胜超;陈小东;王三明;丁洪飞;张远起;黄水传;张智;胡小辉;李建文

来源:实用医学杂志 2014 年 4期

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作者:
黄胜超;陈小东;王三明;丁洪飞;张远起;黄水传;张智;胡小辉;李建文
来源:
实用医学杂志 2014 年 4期
标签:
血管平滑肌细胞 细胞外信号调节激酶1/2 RNA干扰 增殖
目的:探讨 RNA 干扰细胞外信号调节激酶1/2(extracellular signal-regulated kinase 1/2,ERK1/2)基因表达对大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells, VSMCs)增殖的影响。方法:利用脂质体将ERK1/2 siRNA 片段转染入VSMCs,实时荧光定量 RT-PCR 检测 ERK1/2 mRNA 表达水平,Western blotting法检测各组ERK1/2蛋白表达量的变化,MTS法检测细胞的增殖情况。结果:RT-qPCR 结果显示,干预组的ERK1 mRNA 表达量明显下降,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);干预组的 ERK2 mRNA 表达量明显下降,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。Western blotting 结果显示,干预组的ERK1/2蛋白表达相对量明显下降,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。转染24 h、48 h、72 h后,MTS结果显示,干预组细胞的增殖受抑制,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:针对ERK1/2的特异性siRNA能够有效抑制血管平滑肌细胞中的ERK1/2基因表达,并抑制血管平滑肌细胞的增殖。 ERK1/2基因被沉默后,对血管平滑肌细胞的增殖有抑制作用,提示 RNAi 技术沉默 ERK1/2可以作为动脉粥样硬化及血管成形术术后再狭窄防治新的研究方向。