目的：通过慢病毒转染使心肌细胞过表达β3－肾上腺素能受体（β3-adrenoreceptor ，β3-AR ）基因，研究其对体外培养鼠原代心肌细胞肥大的影响。方法：体外培养新生 SD 大鼠心室肌细胞，细胞培养24 h后，分别以转染复数（multiplicity of infection，MOI）20、50、80、100转染只携带绿色荧光蛋白（GFP）慢病毒（空病毒），病毒转染72 h 后，在倒置荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白 GFP 表达情况，以确定最佳转染复数。心肌细胞以最佳 MOI 值转染携带β3-AR 基因慢病毒24 h 后，去甲肾上腺素（ norepinephrine ， NE ）诱导心肌细胞48 h ，建立转染后体外心肌肥厚模型。蛋白免疫印迹法（ Western Blot ）检测β3-AR、原癌基因c-myc、c-fos 的蛋白表达水平。结果：用不同 MOI 的慢病毒转染心肌细胞，转染效率不同，以 MOI ＝50转染效率最高； NE 诱导心肌细胞48 h 后，随β3-AR 表达增加，c-myc、c-fos 蛋白水平表达增加（Control 组：0．098±0．012、0．105±0．008 vs NE组：0．174±0．012、0．164±0．015 vs β3-AR 转染组：0．268±0．010、0．325±0．014，P ＜0．05），心肌肥厚加重。结论：以携带β3-AR 的慢病毒转染心肌细胞可有效增加β3-AR 表达，随β3-AR表达增加，心肌肥厚加重。

作者：张慧；王丽；张源；马依彤；杨毅宁；马苗苗

来源：实用医学杂志 2016 年 32卷 8期