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目的 检测FOXL2基因的过表达及沉默对乳腺癌细胞系MCF-7细胞生长状况的影响.方法 培养乳腺正常细胞系HBL-100和乳腺癌细胞系MCF-7细胞,Trizol法提取两者总RNA,利用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术分别检测FOXL2基因在这两种细胞中的表达水平.用FOXL2-pEGFP质粒和FOXL2-shRNA质粒转染MCF-7细胞,分别使其过表达或沉默FOXL2,并建立分组为过表达FOXL2(A组)及沉默FOXL2(B组)以及未作转染处理的MCF-7细胞(C组),Western blot检测3组FOXL2蛋白表达量,验证转染是否成功,MTT法测转染后3组细胞的增殖情况.结果 RT-PCR结果显示HBL-100和MCF-7细胞均可转录FOXL2的mRNA,且24-△△Ct值>2,证明FOXL2在MCF-7细胞中表现为上调,且差异有统计学意义(P<0.05).成功转染MCF-7细胞后,Western blot结果与C组相比,A组细胞中FOXL2蛋白表达量明显增加,B组细胞中FOXL2蛋白表达量明显减少,差异均有统计学意义(P<0.05),可见模型构建成功.MTT法检测3组MCF-7细胞的OD值及细胞增殖率,A组FOXL2基因过表达,MCF-7细胞的增殖能力明显被抑制,而B组的细胞增殖能力增加,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 FOXL2基因在乳腺癌中高表达,且可以抑制乳腺癌细胞的增殖,可能为一个新的肿瘤抑制因子,但仍需要做进一步的研究.

作者:曲春安;张伟;尹迪迪;李东岳;李敏;王晓雨;张欣;唐胜建

来源:实用医学杂志 2019 年 35卷 6期

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作者:
曲春安;张伟;尹迪迪;李东岳;李敏;王晓雨;张欣;唐胜建
来源:
实用医学杂志 2019 年 35卷 6期
标签:
乳腺肿瘤 HBL-100细胞 MCF-7细胞 FOXL2基因 细胞增殖
目的 检测FOXL2基因的过表达及沉默对乳腺癌细胞系MCF-7细胞生长状况的影响.方法 培养乳腺正常细胞系HBL-100和乳腺癌细胞系MCF-7细胞,Trizol法提取两者总RNA,利用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术分别检测FOXL2基因在这两种细胞中的表达水平.用FOXL2-pEGFP质粒和FOXL2-shRNA质粒转染MCF-7细胞,分别使其过表达或沉默FOXL2,并建立分组为过表达FOXL2(A组)及沉默FOXL2(B组)以及未作转染处理的MCF-7细胞(C组),Western blot检测3组FOXL2蛋白表达量,验证转染是否成功,MTT法测转染后3组细胞的增殖情况.结果 RT-PCR结果显示HBL-100和MCF-7细胞均可转录FOXL2的mRNA,且24-△△Ct值>2,证明FOXL2在MCF-7细胞中表现为上调,且差异有统计学意义(P<0.05).成功转染MCF-7细胞后,Western blot结果与C组相比,A组细胞中FOXL2蛋白表达量明显增加,B组细胞中FOXL2蛋白表达量明显减少,差异均有统计学意义(P<0.05),可见模型构建成功.MTT法检测3组MCF-7细胞的OD值及细胞增殖率,A组FOXL2基因过表达,MCF-7细胞的增殖能力明显被抑制,而B组的细胞增殖能力增加,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 FOXL2基因在乳腺癌中高表达,且可以抑制乳腺癌细胞的增殖,可能为一个新的肿瘤抑制因子,但仍需要做进一步的研究.