目的 研究不同时长下200μmol/L过氧化氢(H2O2)刺激对人脐静脉内皮细胞(human umbil-ical vein endothelial cell,HUVEC)衰老的影响,为氧化应激诱导细胞衰老模型提供参考.方法 把HUVEC分为空白组和H2O2暴露组,暴露组分别在200μmol/L终浓度的H2O2作用0.5、1、3、6、12、24、48和96 h.噻唑蓝比色法(MTT)检测各组细胞活力;细胞衰老-β半糖苷酶染色(SA-β糖苷酶染色)检测细胞衰老情况;酶联吸附反应(enzyme linked immunoabsorbent assay,ELISA)测定各组细胞内皮素-1(endothelin-1,ET-1)、一氧化氮(nitric oxide,NO)含量;比色法测定各组细胞丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(super oxidase dismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathionperoxidase,GSH-px)水平;Western Blot检测Bax、Bcl-2、p21蛋白的表达情况.结果 与空白组相比,H2O2暴露组短时间内(3 h以内)细胞增殖活性增高,少量细胞SA-β糖苷酶染色阳性,ET-1和NO分泌增加;随着刺激时间延长(3～24 h),细胞增殖活性下降,SA-β糖苷酶染色阳性细胞增多,ET-1分泌增多,NO分泌减少(P<0.05),p21表达逐渐增多,Bax、Bcl-2表达无明显差异;48～96 h细胞活力持续下降,SA-β糖苷酶染色阳性率无明显变化,ET-1、NO分泌下降,Bax表达逐渐增加,Bcl-2逐渐减少(P

作者：林朴卿；阮云军

来源：实用医学杂志 2021 年 37卷 10期