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目的 考察ROS/ALOX5/NLRP3信号通路相关蛋白激活在低氧所致肺动脉内皮细胞增殖中的作用.方法 将人肺动脉内皮细胞分别在常氧状态(21%O2)和低氧状态(1%O2)下培养24、48、72及96小时,同时低氧状态下分别设立活性氧(ROS)清除剂Trolox组和ALOX5抑制剂齐留通组.采用CCK-8法检测细胞增殖率的改变,活性氧探针H2-DCFA检测低氧状态下肺动脉内皮细胞内ROS的变化,Western blot法分别检测低氧状态及加入Trolox或齐留通干预后ALOX5、NLRP3和Caspase-1蛋白表达的变化.结果 肺动脉内皮细胞在低氧作用48、72及96 h后可见增殖显著,分别达(135.6±29.4)%、(185.3±21.7)%及(212.3±39.0)%.同时,细胞内ROS在24、48及72 h可检测到显著增加,96小时后基本恢复正常.ALOX5、NLRP3和Caspase-1蛋白随低氧时间增加而表达增多.预先加入ROS清除剂Trolox和ALOX5抑制剂齐留通均可抑制NLRP3炎性小体相关蛋白NLRP3和Caspase-1的表达,且细胞增殖率也显著降低.结论 ROS/ALOX5/NLRP3信号通路在低氧所致的肺动脉内皮细胞增殖中显著激活,抑制这一通路可显著减少低氧所致的内皮细胞增殖.

作者:胡志;马慧;范粉玲;刘文娟;谢航

来源:实用医院临床杂志 2017 年 14卷 6期

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作者:
胡志;马慧;范粉玲;刘文娟;谢航
来源:
实用医院临床杂志 2017 年 14卷 6期
标签:
肺动脉高压 低氧 人肺动脉内皮细胞 NLRP3炎性小体 信号通路 Pulmonary arterial hypertension Hypoxia Human pulmonary artery endothelial cells NLRP3 inflammasome Sig-naling pathway
目的 考察ROS/ALOX5/NLRP3信号通路相关蛋白激活在低氧所致肺动脉内皮细胞增殖中的作用.方法 将人肺动脉内皮细胞分别在常氧状态(21%O2)和低氧状态(1%O2)下培养24、48、72及96小时,同时低氧状态下分别设立活性氧(ROS)清除剂Trolox组和ALOX5抑制剂齐留通组.采用CCK-8法检测细胞增殖率的改变,活性氧探针H2-DCFA检测低氧状态下肺动脉内皮细胞内ROS的变化,Western blot法分别检测低氧状态及加入Trolox或齐留通干预后ALOX5、NLRP3和Caspase-1蛋白表达的变化.结果 肺动脉内皮细胞在低氧作用48、72及96 h后可见增殖显著,分别达(135.6±29.4)%、(185.3±21.7)%及(212.3±39.0)%.同时,细胞内ROS在24、48及72 h可检测到显著增加,96小时后基本恢复正常.ALOX5、NLRP3和Caspase-1蛋白随低氧时间增加而表达增多.预先加入ROS清除剂Trolox和ALOX5抑制剂齐留通均可抑制NLRP3炎性小体相关蛋白NLRP3和Caspase-1的表达,且细胞增殖率也显著降低.结论 ROS/ALOX5/NLRP3信号通路在低氧所致的肺动脉内皮细胞增殖中显著激活,抑制这一通路可显著减少低氧所致的内皮细胞增殖.