目的 探讨在体转染RNAi技术沉默气道高敏感反应模型小鼠骨形态构建蛋白-2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)基因的可行性.方法 Balb/c小鼠20只,随机分为在体转染组10只和对照组10只.在体转染组小鼠于1、7d腹腔注射卵清白蛋白+氢氧化铝混悬液,第7天转染腺病毒载体,于14、21、22 d雾化吸入卵清白蛋白制作气道高敏模型;对照组小鼠于1、7d腹腔注射氢氧化铝,于14、21、22d雾化吸入生理盐水.在体转染组14d采用活体荧光成像法检测在体转染表达情况,2组末次雾化吸入后取肺组织采用Western blot法检测肺组织BMP-2表达水平,采用荧光定量PCR法检测BMP-2 mRNA表达水平.结果 在体转染组小鼠肺部有清晰荧光影像,转染成功;对照组末次雾化后肺组织BMP-2蛋白及mRNA表达水平(0.85±0.08,0.45±0.09)高于在体转染组(0.27±0.03,0.20±0.03)(P<0.01).结论 在体转染RNA干扰气道高敏感反应模型小鼠BMP-2基因的方法可行.
作者:栾永
来源:中华实用诊断与治疗杂志 2014 年 28卷 12期