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目的 探讨miR-326靶向MAPK/MEK信号通路对食管鳞状细胞癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响.方法 20例食管鳞状细胞癌患者,取手术切除食管癌组织和癌旁正常组织,采用实时荧光定量PCR法检测miR-326 mRNA和MAPK mRNA相对表达量,采用免疫组织化学法检测MAPK蛋白表达.3种食管癌细胞系(KYSE150、EC9706、TE-9)和人正常食管上皮细胞系Het-1A,采用实时荧光定量PCR法检测细胞miR-326 mRNA和MAPK mRNA相对表达量,Western blot法检测细胞MAPK蛋白相对表达量.将对数生长期EC9706细胞随机分为miR-326组、转染对照组和空白对照组,miR-326组和转染对照组分别转染miR-326 mimic和mimic NC,空白对照组细胞不作任何处理,采用Western blot法检测细胞MAPK、p-MEK、p-ERK1、p ERK2和p-C-Jun蛋白相对表达量,克隆形成试验检测细胞克隆形成率,划痕试验检测细胞划痕闭合率,Transwell小室试验检测细胞侵袭,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡,荧光素酶活性检测试剂盒检测细胞荧光素酶活性.结果 食管癌组织miR 326 mRNA相对表达量低于癌旁正常组织(P<0.05),MAPK mRNA相对表达量高于癌旁正常组织(P<0.05).KYSE150、EC9706和TE-9细胞miR-326 mRNA相对表达量均低于Het-1A细胞(P<0.05),MAPK mRNA和MAPK蛋白相对表达量高于Het-1A细胞(P

作者:李娜;许春蕾;唐勇;汤旭山;马兰英

来源:中华实用诊断与治疗杂志 2020 年 34卷 9期

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作者:
李娜;许春蕾;唐勇;汤旭山;马兰英
来源:
中华实用诊断与治疗杂志 2020 年 34卷 9期
标签:
食管鳞状细胞癌 miR-326 MAPK/MEK 细胞增殖 细胞迁移 细胞侵袭 细胞凋亡
目的 探讨miR-326靶向MAPK/MEK信号通路对食管鳞状细胞癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响.方法 20例食管鳞状细胞癌患者,取手术切除食管癌组织和癌旁正常组织,采用实时荧光定量PCR法检测miR-326 mRNA和MAPK mRNA相对表达量,采用免疫组织化学法检测MAPK蛋白表达.3种食管癌细胞系(KYSE150、EC9706、TE-9)和人正常食管上皮细胞系Het-1A,采用实时荧光定量PCR法检测细胞miR-326 mRNA和MAPK mRNA相对表达量,Western blot法检测细胞MAPK蛋白相对表达量.将对数生长期EC9706细胞随机分为miR-326组、转染对照组和空白对照组,miR-326组和转染对照组分别转染miR-326 mimic和mimic NC,空白对照组细胞不作任何处理,采用Western blot法检测细胞MAPK、p-MEK、p-ERK1、p ERK2和p-C-Jun蛋白相对表达量,克隆形成试验检测细胞克隆形成率,划痕试验检测细胞划痕闭合率,Transwell小室试验检测细胞侵袭,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡,荧光素酶活性检测试剂盒检测细胞荧光素酶活性.结果 食管癌组织miR 326 mRNA相对表达量低于癌旁正常组织(P<0.05),MAPK mRNA相对表达量高于癌旁正常组织(P<0.05).KYSE150、EC9706和TE-9细胞miR-326 mRNA相对表达量均低于Het-1A细胞(P<0.05),MAPK mRNA和MAPK蛋白相对表达量高于Het-1A细胞(P