目的 探讨小鼠肾足细胞在高糖状态下硫酸酯酶1(sulfatase 1,SULF1)表达情况及其在高糖诱导肾足细胞自噬损伤中的作用机制.方法 小鼠肾足细胞根据干预方式分为对照组(采用5.5 mmol/L葡萄糖处理)、高渗组(采用5.5 mmol/L葡萄糖+19.5 mmol/L甘露醇处理)和高糖组(采用25 mmol/L葡萄糖处理),各组分别处理24 h.小鼠肾足细胞再分为空白对照组、阴性对照组和转染组,空白对照组细胞正常培养,转染组细胞转染Sul f1 siRNA,阴性对照组细胞转染negative siRNA,转染48 h.采用反转录PCR法检测各组细胞Sul f1 mRNA相对表达量,采用Western blot法检测各组细胞SULF1蛋白、微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)-Ⅱ、LC3-Ⅰ、蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)、磷酸化Akt(phosphorylated Akt,p-Akt)、哺乳动物雷帕霉素蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)和磷酸化mTOR(phosphorylated mTOR,p-mTOR)相对表达量,比较p-Akt/Akt p-mTOR/mTOR、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值.结果 高糖组细胞SULF1蛋白相对表达量和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ (0.84±0.20、0.67±0.60)低于对照组(1.42±0.19、1.99±0.31)和高渗组(1.33±0.25、1.75±0.22) (P<0.05),p-Akt/Akt(0.41±0.03)、p-mTOR/mTOR(0.61±0.01)高于对照组(
作者:杜俊杰;杨继红;王慧
来源:中华实用诊断与治疗杂志 2020 年 34卷 10期