目的 探讨miR-216b对顺铂耐药的胃癌细胞增殖和凋亡的作用及可能机制.方法 采用实时荧光定量PCR法检测人胃黏膜细胞系GES-1、人胃癌细胞系SGC7901和胃癌顺铂耐药细胞系SGC7901/DDP的miR-216b相对表达量,采用Western blot法检测3种细胞ATG5蛋白相对表达量.SGC7901/DDP细胞加入不同浓度顺铂,采用CCK-8实验检测顺铂对细胞的半数抑制浓度,确定顺铂在后续实验中浓度.对数生长期SGC7901/DDP细胞随机分为空白对照组(正常培养)、agomir-NC组(转染agomir-NC)、agomir-miR-216b组(转染agomic-miR-216b)、antagomir-NC组(转染antagomir-NC)和antagomir-miR-216b组(转染antagomir-miR-216b),采用实时荧光定量PCR法检测5组细胞miR-216b相对表达量,采用Western blot法检测5组细胞LC3Ⅱ、LC3Ⅰ、ATG5、P62蛋白相对表达量,采用CCK-8实验检测5组细胞活力,采用克隆形成实验检测5组细胞克隆细胞数,采用流式细胞术检测5组细胞凋亡率.采用荧光素酶报告实验检测miR-216b与ATG5的靶向结合.对数生长期SGC7901/DDP细胞随机分为agomir-NC+oe-NC组(转染agomir-NC和oe-NC)、agomir-MiR-216b+oe-NC组(转染agomir-miR-216b和oe-NC)和agomir-miR-216b+oe-ATG5组(转染agomir-miR-216b和oe-ATG5),采用实时荧光定量PCR法检测miR-216b相对表

作者：周京涛；刘佳；李亮；李建刚；努尔买买提·阿米都拉；闫军；寇旭东；艾孜买提·艾海提；马博

来源：中华实用诊断与治疗杂志 2021 年 35卷 8期