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目的 探讨成纤维细胞生长因子8(fibroblast growth factor 8,FGF8)过表达对雄性FVB/N小鼠精子生成的影响及可能机制.方法 构建8只FGF8过表达雄性FVB/N小鼠,于造模后6、11个月各处死4只;10只野生型雄性FVB/N小鼠于造模后6、11个月各处死5只.取睾丸和附睾组织,观察大体形态;应用血细胞计数板计数精子数量,计算FGF8过表达小鼠精子数量占野生型小鼠精子数量的百分比;行HE染色观察睾丸及附睾组织学形态;采用免疫组织化学法检测睾丸组织FGF8、基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)表达.取对数生长期小鼠睾丸支持细胞系 TM4细胞,随机分为 FGF8组(DMEM/F12培养基+25 nmol/L FGF8)、FGFRi 组(DMEM/F12培养基+25 nmol/L FGF8+10 nmol/L FGFRi)、对照组(DMEM/F12培养基),处理48 h,采用实时荧光定量PCR法检测MMP-2 mRNA相对表达量,采用Western blot法检测MMP-2蛋白相对表达量.结果 FGF8过表达6月龄小鼠精子数量为野生型小鼠的67.5%,11月龄小鼠精子数量为野生型小鼠的25.0%.FGF8过表达6、11月龄小鼠睾丸较野生型小鼠缩小,附睾较野生型小鼠增大.野生型6、11月龄小鼠睾丸组织生精小管上皮细胞排列无明显异常;FGF8过表达6、11月龄小鼠睾丸组织生精小管上皮细胞排列紊乱,退化明显,连续性受损,支持细胞上

作者:于岚;张啸龙;冯科;何巧花;张翠莲;Pirkko H?RK?NEN;万锋

来源:中华实用诊断与治疗杂志 2022 年 36卷 3期

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作者:
于岚;张啸龙;冯科;何巧花;张翠莲;Pirkko H?RK?NEN;万锋
来源:
中华实用诊断与治疗杂志 2022 年 36卷 3期
标签:
成纤维细胞生长因子8;基质金属蛋白酶-2;精子生成;小鼠
目的 探讨成纤维细胞生长因子8(fibroblast growth factor 8,FGF8)过表达对雄性FVB/N小鼠精子生成的影响及可能机制.方法 构建8只FGF8过表达雄性FVB/N小鼠,于造模后6、11个月各处死4只;10只野生型雄性FVB/N小鼠于造模后6、11个月各处死5只.取睾丸和附睾组织,观察大体形态;应用血细胞计数板计数精子数量,计算FGF8过表达小鼠精子数量占野生型小鼠精子数量的百分比;行HE染色观察睾丸及附睾组织学形态;采用免疫组织化学法检测睾丸组织FGF8、基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)表达.取对数生长期小鼠睾丸支持细胞系 TM4细胞,随机分为 FGF8组(DMEM/F12培养基+25 nmol/L FGF8)、FGFRi 组(DMEM/F12培养基+25 nmol/L FGF8+10 nmol/L FGFRi)、对照组(DMEM/F12培养基),处理48 h,采用实时荧光定量PCR法检测MMP-2 mRNA相对表达量,采用Western blot法检测MMP-2蛋白相对表达量.结果 FGF8过表达6月龄小鼠精子数量为野生型小鼠的67.5%,11月龄小鼠精子数量为野生型小鼠的25.0%.FGF8过表达6、11月龄小鼠睾丸较野生型小鼠缩小,附睾较野生型小鼠增大.野生型6、11月龄小鼠睾丸组织生精小管上皮细胞排列无明显异常;FGF8过表达6、11月龄小鼠睾丸组织生精小管上皮细胞排列紊乱,退化明显,连续性受损,支持细胞上