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目的 探讨高氧对早产大鼠原代Ⅱ型肺泡上皮细胞(type Ⅱ alveolar epithelial cells,AECⅡ)腺苷受体及其介导的环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)/蛋白激酶 A(protein kinase A,PKA)/cAMP 反应元件结合蛋白(cAMP-response element binding protein,CREB)信号通路的影响.方法 取早产SD大鼠肺组织分离培养原代AECⅡ,分为常氧组和高氧组,分别在氧气浓度21%和95%条件下培养.采用CCK-8法检测细胞培养6、12、24、48、72 h时AECⅡ增殖的光密度值.分别取培养12、24、48 h时2组原代AECⅡ,采用实时荧光定量PCR法检测细胞腺苷受体A1、A2A、A2B、A3 mRNA相对表达量,采用Western blot法检测细胞腺苷受体A1、A2A、A2B、A3蛋白及p-PKA、p-CREB蛋白相对表达量,采用ELISA法检测细胞cAMP水平.结果 培养6 h时,高氧组原代AECⅡ细胞增殖的光密度值(0.69±0.01)与常氧组(0.68±0.02)比较差异无统计学意义(t=-0.698,P=0.520);培养12、24、48、72 h时,高氧组原代 AECⅡ 细胞增殖的光密度值(0.67±0.01、0.58±0.01、0.47±0.01、0.30±0.01)均低于常氧组(0.71±0.02、0.76±0.01、0.97±0.01、1.26±0.02)(P<0.05),随培养时间延长,高氧组原代AEC Ⅱ细胞增殖的光密度值逐渐降低(P<0.05);培养24、48 h时,高氧组

作者:王席娟;孙健伟;张磊;张美慧;张家洁

来源:中华实用诊断与治疗杂志 2022 年 36卷 4期

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作者:
王席娟;孙健伟;张磊;张美慧;张家洁
来源:
中华实用诊断与治疗杂志 2022 年 36卷 4期
标签:
支气管肺发育不良;高氧;腺苷受体;原代Ⅱ型肺泡上皮细胞;环磷酸腺苷;蛋白激酶A;环磷酸腺苷反应元件结合蛋白;大鼠
目的 探讨高氧对早产大鼠原代Ⅱ型肺泡上皮细胞(type Ⅱ alveolar epithelial cells,AECⅡ)腺苷受体及其介导的环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)/蛋白激酶 A(protein kinase A,PKA)/cAMP 反应元件结合蛋白(cAMP-response element binding protein,CREB)信号通路的影响.方法 取早产SD大鼠肺组织分离培养原代AECⅡ,分为常氧组和高氧组,分别在氧气浓度21%和95%条件下培养.采用CCK-8法检测细胞培养6、12、24、48、72 h时AECⅡ增殖的光密度值.分别取培养12、24、48 h时2组原代AECⅡ,采用实时荧光定量PCR法检测细胞腺苷受体A1、A2A、A2B、A3 mRNA相对表达量,采用Western blot法检测细胞腺苷受体A1、A2A、A2B、A3蛋白及p-PKA、p-CREB蛋白相对表达量,采用ELISA法检测细胞cAMP水平.结果 培养6 h时,高氧组原代AECⅡ细胞增殖的光密度值(0.69±0.01)与常氧组(0.68±0.02)比较差异无统计学意义(t=-0.698,P=0.520);培养12、24、48、72 h时,高氧组原代 AECⅡ 细胞增殖的光密度值(0.67±0.01、0.58±0.01、0.47±0.01、0.30±0.01)均低于常氧组(0.71±0.02、0.76±0.01、0.97±0.01、1.26±0.02)(P<0.05),随培养时间延长,高氧组原代AEC Ⅱ细胞增殖的光密度值逐渐降低(P<0.05);培养24、48 h时,高氧组