目的 探讨CDC25B1基因在人胰腺癌细胞株Patu8988中的表达情况,并将真核表达重组载体pcDNA-CDC25B1转染至细胞中,观察CDC25B1基因对细胞生物学行为的影响,以了解它在细胞周期及胰腺肿瘤细胞恶性转化方面的作用,为研究胰腺癌的发病机制与治疗提供理论依据.方法 利用Lipolectamine2000将CDC25B1转染至人胰腺癌细胞株Patu8988中,通过RT-PCR和Western blot在mRNA和蛋白水平验证质粒转染成功,通过MTT实验、侵袭实验和细胞周期检测,观察CDC25B1对细胞生物学行为的影响. 结果 RT-PCR发现在胰腺癌细胞株Patu8988和转染空质粒的细胞株中,CDC25B1在mRNA水平表达很弱;转染pcDNA-CDC25B1组中CDC25B1高表达.Western blot发现在胰腺癌细胞株Patu8988中,CDC25B蛋白有少量表达;转染pcDNA-CDC25B1组CDC25B蛋白高表达.MTT实验显示,转染pcDNA-CDC25B1组的细胞生长在72 h受到明显抑制(P<0.05).侵袭实验显示,转染pcDNA-CDC25B1的细胞其穿透Matrigel胶的能力明显增强(P<0.05).流式细胞计量术显示,转染了pcDNA-CDC25B1组中,G1期的细胞明显增多(P<0.05);同时转染了pcDNA-CDC25B1组中,G2期的细胞明显减少,与未处理组比较有统计学意义(P<0.05). 结论 在胰腺癌细胞株Patu8988中的CDC25B1转录水平很弱,存在少量CDC25B蛋白表达.转染的CD

作者：肖志；石欣；杨正平；张齐；孔波；严伟；葛梓

来源：实用肿瘤学杂志 2008 年 22卷 5期