目的 探讨miR-34a对结直肠癌细胞自噬和增殖的调控机制.方法 采用实时定量反转录PCR检测2019年5月至2020年5月期间中国医科大学附属第四医院结直肠癌手术切除的30例结直肠癌组织以及相应癌旁组织中miR-34a的表达水平,同时检测结直肠癌细胞(RKO、LoVo、SW480和SW620)和人正常结肠上皮细胞(FHC)中miR-34a的表达水平.通过pcDNA3.1-miR-34a转染结直肠癌细胞株SW480以过表达miR-34a.CCK-8法检测细胞活性.Western blot检测自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(microtubular associated protein 1 light chain 3,LC3)-Ⅱ/LC3-Ⅰ和自噬相关基因7(autophagy associated gene 7,ATG7)的表达.免疫荧光检测LC3荧光斑点表达.Starbase数据库分析miR-34a与ATG7的相关性,并采用荧光素酶报告基因实验验证miR-34a与ATG7的结合情况.SW480细胞共转染pcDNA3.1-miR-34a和pcDNA3.1-ATG7后,CCK-8法检测细胞活性,克隆形成实验检测细胞增殖水平.结果 miR-34a在结直肠癌组织的表达低于相应癌旁组织,在结直肠癌细胞(RKO、LoVo、SW480和SW620)中的表达低于FHC细胞(均P<0.05).过表达miR-34a 72 h后SW480细胞活性降低(P<0.01),自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ降低(P<0.01),免疫荧光显示LC3荧光斑点减少(P<0.01).过表达miR-34a 24 h后SW480细胞ATG7

作者：文彩艳；李晓霞

来源：实用肿瘤杂志 2022 年 37卷 4期