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目的:探讨马兜铃酸I(Aristolochic acid I,AAI)在人类肾小管上皮细胞(HKC)转分化中的可能作用,了解AAI引起肾小管间质损害的机制。方法:将体外培养HKC细胞分为无血清对照组(C组)和AAI实验组两组,在AAI组培养液中加入不同剂量AAI;两组HKC细胞分别培养48h后,应用间接免疫荧光法检测HKC细胞角蛋白、波形蛋白和α-1平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)表达的变化;应用流式细胞技术检测表达α-SMA阳性(+)的HKC细胞百分率;采用免疫酶标技术(ELISA)检测HKC细胞上清液中转化生长因子β1(TGF β1)的表达。结果:间接免疫荧光法观察,可见不同剂量AAI处理后的HKC细胞表达角蛋白减弱,表达α-SMA及波形蛋白增强;应用流式细胞术检测,发现不同剂量AAI(10,20,40,80 μg/L)处理后,表达α-SMA(+)的HKC细胞百分率与AAI剂量呈正相关(r=0.0867,P<0.005);当AAI为20,40,80μg/L时,HKC细胞表达α-SMA百分率为8.6%,9.6%,13.4%,较C组(平均值为3.1%)明显增高(P<0.05)。应用ELISA法观测AAI对HKC细胞分泌TGF β1的影响,可见C组HKC细胞有基础水平的TGFβ1分泌(21.7%ng/L);当予一定剂量的AAI(10,20μg/L)刺激HKC细胞24h后,细胞上清液中TGFβ1水平明显升高(75.6 ng/L,65.6 ng/L vs

作者:文晓彦;郑法雷;高瑞通;李艳;孙阳;张晓明;GAO Ruitong;Ll Yan

来源:肾脏病与透析肾移植杂志 2000 年 9卷 3期

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作者:
文晓彦;郑法雷;高瑞通;李艳;孙阳;张晓明;GAO Ruitong;Ll Yan
来源:
肾脏病与透析肾移植杂志 2000 年 9卷 3期
标签:
马兜铃酸I 肾小管上皮细胞 细胞转分化 transdifferentiation human renal tubular epithelial cells arostolochic acid I
目的:探讨马兜铃酸I(Aristolochic acid I,AAI)在人类肾小管上皮细胞(HKC)转分化中的可能作用,了解AAI引起肾小管间质损害的机制。方法:将体外培养HKC细胞分为无血清对照组(C组)和AAI实验组两组,在AAI组培养液中加入不同剂量AAI;两组HKC细胞分别培养48h后,应用间接免疫荧光法检测HKC细胞角蛋白、波形蛋白和α-1平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)表达的变化;应用流式细胞技术检测表达α-SMA阳性(+)的HKC细胞百分率;采用免疫酶标技术(ELISA)检测HKC细胞上清液中转化生长因子β1(TGF β1)的表达。结果:间接免疫荧光法观察,可见不同剂量AAI处理后的HKC细胞表达角蛋白减弱,表达α-SMA及波形蛋白增强;应用流式细胞术检测,发现不同剂量AAI(10,20,40,80 μg/L)处理后,表达α-SMA(+)的HKC细胞百分率与AAI剂量呈正相关(r=0.0867,P<0.005);当AAI为20,40,80μg/L时,HKC细胞表达α-SMA百分率为8.6%,9.6%,13.4%,较C组(平均值为3.1%)明显增高(P<0.05)。应用ELISA法观测AAI对HKC细胞分泌TGF β1的影响,可见C组HKC细胞有基础水平的TGFβ1分泌(21.7%ng/L);当予一定剂量的AAI(10,20μg/L)刺激HKC细胞24h后,细胞上清液中TGFβ1水平明显升高(75.6 ng/L,65.6 ng/L vs