目的:观察脂肪酸结合蛋白3(FABP3)过度增加对足细胞脂肪代谢的影响. 方法:慢病毒载体转染小鼠永生化足细胞系(HSMPs)以构建稳定过表达FABP3的细胞系.将FABP3-siRNA转染至HSMPs中沉默FABP3,筛选干扰效率最大的FABP3-siRNA片段进行后续干扰实验.实验分组:(1)正常足细胞组;(2) NC-siRNA足细胞组;(3) FABP3-siRNA足细胞组;(4)NC足细胞组;(5)FABP3过表达足细胞组;(6)正常足细胞+棕榈酸(PA)组;(7) NC-siRNA足细胞+PA组;(8) FABP3-siRNA足细胞+PA组;(9)NC足细胞+PA组;(10) FABP3过表达足细胞+PA组.比色法测定细胞内TG和游离脂肪酸的含量.定量PCR法检测各组细胞中过氧化物酶增殖激活受体α(PPARα)、酰基辅酶A氧化酶3(ACOX3) mRNA的表达.Western Blot法检测PPARα、ACOX3蛋白表达水平. 结果:与正常足细胞组相比,FABP3过表达足细胞组细胞内三酰甘油(TG)和游离脂肪酸水平增加(P<0.05),而FABP3-siRNA足细胞组TG和游离脂肪酸水平下降(P<0.05).不论在正常环境还是PA环境下,与正常足细胞组相比,FABP3过表达足细胞组PPARα mRNA和蛋白表达均下调(P<0.05),而ACOX3 mRNA和蛋白表达均上调(P<0.05);FABP3-siRNA足细胞组PPARα mRNA和蛋白表达均上调(P<0.05),而ACOX3 mRNA和蛋白表达均下调(P<0.05).与FABP3过表达足细胞
作者:高清;徐波;郭汉城;刘俊兰;关天俊
来源:肾脏病与透析肾移植杂志 2015 年 24卷 4期