目的 探讨Smac基因过表达联合天花粉蛋白(TCS)对人宫颈癌Caski细胞凋亡影响及其相关机制.方法 构建真核表达质粒pcDNA3.1(-)/Smac,稳定转染入宫颈癌Caski细胞后,筛选Smac高表达的细胞株Caski/Smac;RT-PCT和Western blot法分别用于测定Smac基因在mRNA和蛋白水平上的表达水平;MTr法观察Smac高表达对Caski细胞生长及对TCS敏感性的影响;流式细胞仪分析TCS对Caski细胞凋亡的影响.结果 ①TCS能诱导Caski细胞内Smac基因表达,且呈时间与浓度依耐性;②成功获得Smac基因高表达的细胞株Caski/Smac;③Smac高表达使Caski细胞生长速度明显减慢(P<0.01),且对TCS的敏感性显著性增加(P<0.01);④TCS作用于Caski细胞可诱发其凋亡,但Smac高表达的细胞凋亡更为明显,差异具有显著性(P<0.01).结论 Smac基因过表达能增加Caski细胞对TCS的敏感性,在同等药物浓度下能更明显抑制细胞增殖和促进其凋亡.此外,TCS也能够诱导细胞中Smac基因表达,这可能是其促细胞凋亡的机制之一.
作者:刘瑞雪;黄利鸣;王艳林;黄益玲;尤程程;崔磊;黄玉蓉;吴丽婷
来源:时珍国医国药 2013 年 24卷 5期