目的:探讨单精子测序结合PCR-反向点杂交（PCR-reverse dot blot，PCR-RDB）技术在东南亚缺失型α地中海贫血胚胎植入前遗传学检测中的应用价值。方法:选取2020年4月24日就诊于广州医科大学附属第三医院妇产科的一对东南亚缺失型α地中海贫血携带者夫妇，针对男方无法提供家系成员样本的情况，本案例采用上游法结合显微操作移液管挑选其5份单精子样本并进行全基因组扩增，通过PCR-RDB技术确定男方单精子样本的地中海贫血基因分型，在--
SEA区域的上下游1 Mb范围内选择单核苷酸多态性位点（single nucleotide polymorphism，SNP）作为遗传标记，进行二代测序分析构建双亲单体型。对6份囊胚活检样本进行全基因组扩增后行二代测序，通过单体型分析胚胎是否携带致病变异，并选取非患病囊胚进行移植。孕20周抽羊水进行产前诊断，验证与单基因病胚胎植入前遗传学检测（preimplantation genetic testing for monogenetic disease，PGT-M）结果是否一致。
结果:女方的致病变异来源于其母亲，男方5份单精子样本的地中海贫血基因分型结果显示有4份为野生型。单精子测序筛选出男方有效位点10个，女方家系连锁分析得到女方有效位点6个，PGT-M结果显示4枚囊胚为αα/--
SEA，2枚为--
SEA/--
作者：何健淳；黎青；王燕超；冼嘉嘉；张敏聪；何文智；马晓燕；叶国新；王晓蔓；李少英
来源：中华生殖与避孕杂志 2023 年 43卷 4期
