目的克隆K-ras癌基因,测定其序列及突变类型,构建逆转录病毒表达载体.方法通过逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法从胰腺癌细胞株中克隆K-ras基因,与T-Vector载体连接后测序.构建含K-ras基因的逆转录病毒载体.结果胰腺癌细胞株Bxpc-3、Sw1990未及点突变,Patu8988 12位密码子的GGT突变为GTT,13、61位无突变.酶切证明逆转录病毒表达载体构建成功.结论 K-ras癌基因的成功克隆及逆转录病毒表达载体的构建,为胰腺癌的免疫治疗研究奠定了基础.
作者：杨波；何杨；吴翼伟；张志德
来源：苏州大学学报(医学版) 2004 年 24卷 2期
