目的 在改良子宫内膜细胞原代分离培养方法的基础之上,探讨米非司酮对原代分离培养的人子宫内膜基质细胞增殖的抑制作用. 方法 利用改良后的“二次消化法”分离培养增殖期人子宫内膜基质和上皮细胞,进行细胞形态学观察,并通过流式细胞术检测入子宫内膜基质和上皮细胞的波形蛋白和角蛋白表达阳性的细胞比率,计算分离培养的基质和上皮细胞的纯度;采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测米非司酮对原代分离培养人子宫内膜基质细胞的半数抑制浓度(IC50).结果 原代分离培养的基质细胞较上皮细胞生长迅速.流式细胞检测结果显示,分离培养的基质细胞波形蛋白阳性率达97%,上皮细胞角蛋白阳性率达90%.米非司酮处理人子宫内膜基质细胞2d或3 d后,结果均显示,随着米非司酮浓度增加,基质细胞的细胞抑制率(IR)逐渐升高.米非司酮作用基质细胞2d后,50和100μmol/L组的IR值均高于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05);米非司酮作用3d后,25、50和100 μmol/L组的IR值均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).通过对IR值进行直线回归分析,结果表明:米菲司酮处理2 d和3 d对原代入子宫内膜基质细胞的IC50分别为52.85μmol/L和86.46μmol/L. 结论 改良后的“二次消化法”可获得高纯度人子宫内膜基质细胞和上皮细胞.米非司酮对原代人
作者:郭永;赵爱华;苏晨;丁宁;张瑶楠;刘庆;王乾兴
来源:生殖医学杂志 2014 年 23卷 6期