目的 研究精子顶体相关基因SPACA7转录起始位点上游-2000bp至下游+84bp范围内启动子活性.方法 利用启动子截短实验获得人类SPACA7基因转录起始位点上游-2000bp与下游+84bp序列的系列不同长度的启动子共16个,以人肾上皮细胞293T基因组DNA为模板,进行PCR反应,将不同长度的启动子重组至荧光素酶表达载体pGL3 basic中并转染细胞,转染24h后收集细胞加入裂解液,收集细胞裂解液,利用多功能酶标仪测定荧光素酶活性.结果 我们研究了SPACA7启动子-2000bp至+84bp序列,构建了16个不同长度的promoter::Luciferase,荧光素酶活性检测结果发现各个启动子都具有一定的活性,其中-1500bp至+84bp序列启动子活性最高.结论 初步证明精子顶体相关基因SPACA7启动子在-1500bp至+84bp区域具有较强转录活性.
作者:张菁华;周永翠;唐爱发
来源:生殖医学杂志 2018 年 27卷 5期