目的 研究邻苯二甲酸单(2-乙基己基)酯(MEHP)是否诱导人卵巢颗粒细胞系KGN细胞铁死亡并影响其增殖.方法 取对数增长期的人卵巢颗粒细胞系KGN细胞,给予不同浓度(0、100、200、400、800、1 600 μmol/L)MEHP处理24 h.通过普通光镜观察不同浓度MEHP处理后KGN细胞形态的改变;用CCK-8检测MEHP对细胞活力和增殖能力的影响;采用蛋白免疫印迹(WB)观察铁死亡相关蛋白(ACSL4、GPX4、SLC7A11、FTH1)在KGN细胞中的表达情况;使用细胞铁含量检测试剂盒、丙二醛(MDA)含量检测试剂盒、活性氧(ROS)荧光探针(DCFH-DA)及超氧化物阴离子荧光探针(DHE)分别检测对照组和400 μmol/L MEHP处理组细胞的铁含量、MDA、ROS和超氧化物阴离子水平.结果 (1)光镜观察显示,400 μmol/L及以上MEHP处理使KGN细胞皱缩变圆,形态异常.(2)CCK-8结果显示400 μmol/L及以上MEHP处理抑制细胞增殖,且具有剂量依赖性(P<0.05).(3)100、200 μmol/L MEHP处理组KGN细胞铁死亡相关蛋白表达无显著改变(P>0.05);400 μmol/L MEHP 处理组 KGN 中 ACSL4 蛋白表达水平显著增加(P<0.05),而 GPX4、SLC7A11、FTH1 蛋白表达水平显著下降(P<0.05).(4)400 μmol/L MEHP处理使得KGN细胞的铁含量、MDA水平显著上升(P<0.05),细胞ROS、超氧化物阴离子荧光染色强度明
作者:丁慧敏;项雨;吴洪慧;徐天月;葛红山
来源:生殖医学杂志 2023 年 32卷 10期