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目的:用3种方法从人外周血分离单核细胞,比较细胞纯度、得率、实验成本及所需时间,选择最适宜的分离方法.方法:用密度梯度离心法获得外周血的单个核细胞,分别用贴壁法、免疫磁珠法和流式细胞术法进一步分离单核细胞.经CD14抗体标记,用流式细胞术检测细胞纯度,计算细胞得率、实验成本及所需时间.结果:用贴壁法、免疫磁珠法和流式细胞术法分离单核细胞,细胞纯度分别为18.8%、80%和73.4%;细胞得率为5%、11%和7.5%;每获得2×107个单核细胞,实验成本约500元、1 500元和2 100元,实验耗时约6h、6h和10h.结论:免疫磁珠法是最适宜的分离人外周血单核细胞的方法,具有细胞纯度与得率较高,实验成本较低,耗时较短的优点.

作者:陈丹;王小东;童静植;丁文;孙科;何景华;强兆艳;李光;康毅

来源:天津医科大学学报 2014 年 20卷 6期

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陈丹;王小东;童静植;丁文;孙科;何景华;强兆艳;李光;康毅
来源:
天津医科大学学报 2014 年 20卷 6期
标签:
单核细胞 贴壁法 免疫磁珠 流式细胞术 monocyte adherent separation method immune magnetic beads separation flow cytometry separation
目的:用3种方法从人外周血分离单核细胞,比较细胞纯度、得率、实验成本及所需时间,选择最适宜的分离方法.方法:用密度梯度离心法获得外周血的单个核细胞,分别用贴壁法、免疫磁珠法和流式细胞术法进一步分离单核细胞.经CD14抗体标记,用流式细胞术检测细胞纯度,计算细胞得率、实验成本及所需时间.结果:用贴壁法、免疫磁珠法和流式细胞术法分离单核细胞,细胞纯度分别为18.8%、80%和73.4%;细胞得率为5%、11%和7.5%;每获得2×107个单核细胞,实验成本约500元、1 500元和2 100元,实验耗时约6h、6h和10h.结论:免疫磁珠法是最适宜的分离人外周血单核细胞的方法,具有细胞纯度与得率较高,实验成本较低,耗时较短的优点.