目的：探讨Zeste同源序列2的增强子（EZH2）的小分子抑制剂DZNEP抑制人头颈部鳞状细胞癌细胞Tb3.1增殖、诱导凋亡的效果与机制。方法：甲基噻唑基四唑（MTT）法测细胞对DZNEP的半数致死量（IC50）、细胞的增殖能力；流式细胞术检测细胞凋亡；平板克隆法检测细胞形成克隆能力；JC-1荧光探针染色法检测细胞线粒体膜电位；蛋白质印迹法（WB）检测EZH2、细胞增殖核抗原（Ki－67）、B细胞淋巴瘤2（Bcl－2、BAX）、活化型含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（CCASP－3）的表达。体内实验裸鼠皮下荷瘤模型，通过免疫组织化学染色及原位末端标记（TUNEL）法检测DZNEP对细胞增殖、凋亡的作用。结果：经DZNEP处理后，EZH2蛋白表达降低；MTT法检测DZNEP明显抑制鳞癌细胞Tb3．1的增殖，且具有浓度和时间依赖性；流式细胞术显示DZNEP可诱导细胞凋亡；平板克隆实验表明DZNEP能够明显抑制克隆形成能力，抑制细胞增殖；JC－1荧光探针染色法显示DZNEP可以改变细胞的线粒体膜电位；WB显示，DZNEP可增加促凋亡基因（CCASP－3、BAX）的表达，抑制Ki－67、Bcl－2的表达水平。体内实验观察结束时，DZNEP处理组肿瘤体积较对照组明显减小。免疫组织化学染色结果示，DZNEP组中BAX、CCASP－3表达增加，Ki－67、Bcl－2表达减少；TUNEL
作者：孔令平；周旋；孙姗姗；黄媛媛；张仑
来源：天津医科大学学报 2015 年 6期
