目的:建立一种基于纳米粒子的时间分辨(TR)荧光共振能量转移(FRET)生物传感器用于miRNAs的无扩增检测。方法:以寡核苷酸单链probe I偶联GdF3:Tb3+纳米粒子作为供体,以寡核苷酸单链probe II偶联金(Au)纳米粒子作为受体,利用供体与受体之间的FRET检测目标miRNA hsa-miR-122-5p浓度,并通过设置多功能酶标仪的检测延迟去除自发荧光背景以提高灵敏度。结果:该传感器能够高灵敏度、高特异性地检测目标分子,并且对于光照有良好的耐受性,而且能够避免自发荧光干扰。对hsa-miR-122-5p的检测线性范围为0.1 fmol/L~100 pmol/L,与同类型的RNA荧光传感器的检测限具有可比性。结论:基于纳米粒子的TR-FRET生物传感器用于miRNAs的无扩增检测具有良好的灵敏度和特异性。
作者:张毅;谭加兴;叶彦恺;姜炜;孙艳华;沈万秋;曹海燕;靳美娜;秦楠;段宏泉
来源:天津医科大学学报 2015 年 6期