目的克隆并合成Eph受体的两个主要配体 ephrin-A1和ephrin-B1的融合蛋白.方法利用RT-PCR技术, 分别扩增了ephrin-A1、ephrin-B1胞外序列和小鼠IgG2b的Fc序列,将其连接后, 插入pAlterMax表达载体, 得到两个重组子pAlterMax-ephrin-A1-Fc和pAlterMax-ephrin-B1-Fc, 经序列测定, 确认无突变产生后转染至293T细胞, 使之表达分泌型ephrin-A1-Fc和ephrin-B1-Fc可溶性融合蛋白,并利用蛋白A琼脂糖凝胶纯化.利用免疫沉淀和Western blot检测了ephrin-A1-Fc和ephrin-B1-Fc的相应受体的活性.结果 Ephrin-A1和ephrin-B1融合蛋白可以成功刺激其相应的Eph受体, 使之发生磷酸化.结论制备得到的两个融合蛋白具有相应的生物活性,为进一步研究 Eph受体酪氨酸激酶家族的功能打下了基础.
作者：张合喜；程晋鹏；王友洁；郝巧玲
来源：华中科技大学学报（医学版） 2005 年 34卷 3期
