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目的阐明炎性过程中氧化和抗氧化水平对脐血粒细胞生长和凋亡的调节作用.方法体外肝素化脐血加脂多糖(LPS)模拟内毒素血症,设①对照组;②实验组:加入1μg/ml LPS;③治疗组:加入LPS 1μg/ml前加N-乙酰半胱氨酸(NAC)10 mmol/L孵育30 min.采用luminol增强化学发光检测活性氧(ROS),放射性免疫技术检测肿瘤坏死因子(TNF-α),Western blot检测粒细胞胞质和胞核中核因子(NF-κB)的表达,采用粒细胞集落(CFU-G)形成评价粒细胞的生长和流式细胞术检测粒细胞的凋亡和坏死.结果①实验组ROS产生水平高于对照组和治疗组(P<0.05).②实验组LPS作用2、6、12、24 h时的TNF-α水平明显高于对照组(P<0.05),在2、6 h时明显高于治疗组(P<0.05).③LPS刺激激活NF-κB p65表达从胞质转移到胞核,NAC治疗抑制了NF-κB的激活.④实验组CFU-G数目明显低于对照组和治疗组(P<0.05).⑤脐血粒细胞体外培养24 h,实验组与对照组相比凋亡率明显降低(P<0.05),坏死率明显增高(P<0.01);治疗组与实验组相比凋亡率升高,坏死率降低(P<0.05).结论抗氧化剂通过清除LPS刺激粒细胞产生的ROS,可调节粒细胞的生长和凋亡.

作者:刘亚兰;夏传雄;李林芸

来源:华中科技大学学报(医学版) 2006 年 35卷 1期

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作者:
刘亚兰;夏传雄;李林芸
来源:
华中科技大学学报(医学版) 2006 年 35卷 1期
标签:
内毒素 活性氧 粒细胞 细胞凋亡 抗氧化作用
目的阐明炎性过程中氧化和抗氧化水平对脐血粒细胞生长和凋亡的调节作用.方法体外肝素化脐血加脂多糖(LPS)模拟内毒素血症,设①对照组;②实验组:加入1μg/ml LPS;③治疗组:加入LPS 1μg/ml前加N-乙酰半胱氨酸(NAC)10 mmol/L孵育30 min.采用luminol增强化学发光检测活性氧(ROS),放射性免疫技术检测肿瘤坏死因子(TNF-α),Western blot检测粒细胞胞质和胞核中核因子(NF-κB)的表达,采用粒细胞集落(CFU-G)形成评价粒细胞的生长和流式细胞术检测粒细胞的凋亡和坏死.结果①实验组ROS产生水平高于对照组和治疗组(P<0.05).②实验组LPS作用2、6、12、24 h时的TNF-α水平明显高于对照组(P<0.05),在2、6 h时明显高于治疗组(P<0.05).③LPS刺激激活NF-κB p65表达从胞质转移到胞核,NAC治疗抑制了NF-κB的激活.④实验组CFU-G数目明显低于对照组和治疗组(P<0.05).⑤脐血粒细胞体外培养24 h,实验组与对照组相比凋亡率明显降低(P<0.05),坏死率明显增高(P<0.01);治疗组与实验组相比凋亡率升高,坏死率降低(P<0.05).结论抗氧化剂通过清除LPS刺激粒细胞产生的ROS,可调节粒细胞的生长和凋亡.