目的 探讨胚胎干细胞(ESC)分化为运动神经元的方法.方法 用含重组人白血病抑制因子(LIF, 1 000 U/μl)的培养液培养胚胎干细胞,第3天,悬滴法培养拟胚体(embryoid body, EB),第5天添加音猬酸(sonic hedgehog,Shh,5 nmol/L)和维甲酸(RA,1 μmol/L),再培养5 d;然后将EB贴于铺有基质胶(matrigel)的培养皿上.采用免疫细胞荧光及流式细胞术检测运动神经元的分化.结果 胚胎干细胞可以在LIF存在条件下撤去饲养层细胞,并保持未分化状态,碱性磷酸酶和OCT-4检测阳性.Shh和RA处理后5 d,胚胎干细胞可以分化为运动神经元,运动神经元核转录因子HB-9阳性:未经Shh和RA处理的胚胎干细胞几乎没有HB-9阳性细胞.流式细胞检测(36.09±8.68)
作者：邢变枝；陈红；钱坤；湛彦强；张苏明
来源：华中科技大学学报（医学版） 2009 年 38卷 1期
