目的：探讨靶向瘦素（leptin）基因的小干扰RNA（small interfering RNA ，siRNA）对leptin表达，肝星状细胞（hepatic stellate cell ，HSC）的增殖、凋亡及细胞内钙离子浓度（intracellular Ca2＋ concentration ，[Ca2＋]i ）的影响，为肝纤维化基因治疗提供可行的方案。方法 HSC分为4组：正常对照组、空载体组、siRNA对照组、leptin‐siRNA组。依分组要求分别转染 HSC后，采用M T T法和流式细胞技术检测各组细胞的凋亡和增殖；应用免疫细胞化学SP法、Western blot法检测leptin蛋白的表达；Fura‐2／AM负载检测[Ca2＋]i变化。结果与HSC的正常对照组、空载体组及siRNA对照组相比，leptin‐siRNA组可以有效抑制leptin基因的表达和细胞增殖（P＜0.05），且不同时段（24、48、72 h）细胞抑制率之间有显著差异（P＜0.05）。leptin‐siRNA组细胞凋亡比例明显增加（P＜0.01）；[Ca2＋]i显著降低（P＜0.05）。结论leptin‐siRNA可以通过沉默leptin基因表达而抑制 HSC的增殖、促进凋亡和减少[Ca2＋]i 。leptin在肝纤维化发展中起着重要作用，有望成为肝纤维化一个新的预测和预后的标志。
作者：薛秀兰；林菊生
来源：华中科技大学学报（医学版） 2014 年 6期
