目的：研究胞内环磷酸腺苷（cAMP）水平提高对小鼠心肌成纤维细胞（MCFs）表达结缔组织生长因子（CT‐GF）的影响及其信号通路。方法采用出生1周内C57BL乳鼠心脏分离培养原代MCFs，第3代MCFs使用腺苷酸环化酶激活剂Forskolin干预培养后检测细胞CTGF、蛋白激酶A（PKA）、p44/42丝裂素活化蛋白激酶（MAPK）及磷酸化p44/42MAPK表达情况。分别给予磷酸化p44/42MAPK抑制剂PD98509及PKA抑制剂Rp‐cAMPS阻断相关信号节点，检测细胞内PKA、p44/42MAPK、磷酸化p44/42MAPK以及CTGF表达变化。结果Forskolin干预培养MCFs细胞后，胞内cAMP水平提高，细胞活力下降，PKA表达上升，p44/42MAPK总蛋白无明显改变，p44/42MAPK磷酸化水平下降，CTGFmRNA及蛋白表达下降；给予PD98509抑制p44/42MAPK磷酸化后，PKA表达上升，CTGFmRNA及蛋白表达下调；Rp‐cAMPS抑制PKA活化后，p44/42MAPK磷酸化水平升高，CTGFmRNA及蛋白表达上调。结论Forskolin可以通过提高MCFs胞内cAMP水平抑制CTGF的表达，其作用信号通路为高水平cAMP上调PKA表达，降低下游p44/42MAPK磷酸化水平，抑制CTGF的表达。
作者：刘波；黄晓帆；李冬寒；王生伟；杜心灵
来源：华中科技大学学报（医学版） 2015 年 1期
