目的 探讨调控疱疹病毒相关泛素特异性蛋白酶(HAUSP)对胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响.方法 构建HAUSP过表达及低表达质粒,转染胶质瘤 U87、U251细胞,上调或下调胶质瘤细胞中 HAUSP表达水平.荧光定量PCR、Western blot检测胶质瘤细胞中HAUSP mRNA和蛋白表达水平;利用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞增殖水平;流式细胞术检测细胞凋亡变化.同时检测各组细胞NANOG mRNA 和蛋白表达情况.结果 成功构建稳定HAUSP过表达和低表达U87、U251细胞株;与空白对照组相比,HAUSP过表达组细胞中,HAUSP的mRNA、蛋白水平均明显增加,NANOG mRNA水平无明显变化,但NANOG蛋白水平增加,同时细胞增殖能力增强,细胞凋亡水平降低;与空白对照组相比,HAUSP干扰组细胞中,HAUSP的mRNA、蛋白水平表达均降低,NANOG mRNA水平无明显变化,但NANOG蛋白水平降低,同时细胞增殖能力减弱,细胞凋亡水平增加.结论 HAUSP过表达可促进胶质瘤细胞的增殖,这一过程中伴随着NANOG蛋白水平的增高.因此,HAUSP可能通过维持NANOG去泛素化状态而维持胶质瘤细胞的增殖活性.
作者：程传东；牛朝诗；董永飞；牛万祥；杨洋
来源：华中科技大学学报（医学版） 2017 年 46卷 6期
