目的 探讨人乳头瘤病毒16E7(human papillomavirus V16E7,HPV16E7)能否通过调控细胞内miR-29a表达促进细胞增殖,从microRNA的角度探讨高危型HPV的致癌机制.方法 将HPV16E7基因构建到真核表达载体pcD-NA3.1(-),将重组质粒及空载质粒分别转染人前列腺癌细胞PC3,经G418筛选,通过RT-PCR、流式细胞术检测稳定转染效果;用MTT法、流式细胞术检测克隆细胞株的生物学活性,半定量RT-PCR检测E7对PC3细胞中miR-29a表达的影响.结果 重组质粒经酶切及测序鉴定显示构建成功,并获得稳定表达 E7的 PC3克隆细胞株.与阴性对照组PC3-3.1(-)比较,克隆细胞株PC3-E7增殖能力显著增强(P<0.01),G0/G1期细胞明显减少,而S期和G2/M 期细胞明显增多(均 P<0.05);PC3-E7细胞中miR-29a表达量显著低于对照组(P<0.01).结论 HPV16E7可以加速细胞周期G1向S期进展,其机制可能与其下调miR-29a有关.
作者：熊焱强；冯晶；刘朝奇；李志英
来源：华中科技大学学报（医学版） 2018 年 47卷 2期
