应用SOEing方法构建SOD1-G93A的真核表达载体-临床诊疗知识库

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作者：

陆玉成；车峰远；苏全平；尤翠平；王龙；王富敏；于继徐

来源：

天津医药 2013 年 12期

标签：

超氧化物歧化酶点突变质粒 DNA,重组肌萎缩侧索硬化重叠区扩增基因拼接法

目的：构建铜/锌超氧化物歧化酶（Cu/Zn superoxide dismutase, SOD1）-G93A的真核表达载体。方法应用重叠区扩增基因拼接法（SOEing）分别扩增前段M1基因与包含突变位点的后段M2基因，然后将2段基因拼接起来，得到SOD1-G93A基因，并克隆至pcDNA3.1(-)真核表达载体上。结果成功扩增出SOD1-G93A基因，测序结果与GenBank完全一致；对重组质粒SOD1-G93A-pcDNA3.1(-)进行双酶切鉴定，测序结果与预期完全一致。结论成功构建了SOD1-G93A-pcDNA3.1(-)真核表达载体。

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