目的:应用吖啶橙荧光(AO-F)染色法搭建循环肿瘤细胞(CTCs)筛选平台,并将其应用于肾癌患者外周血CTCs筛查。方法选择转移性肾细胞癌患者27例(研究组),用不同浓度的血清培养肾癌原代肿瘤细胞和细胞系769-P,分别制备涂片于荧光显微镜下,观察细胞形态及着色情况是否一致;随机计数5个视野下AO-F阳性(+)细胞占769-P细胞的比例,评估AO-F染料对肿瘤细胞的敏感性;清晨抽取10例健康体检者(对照组)空腹外周血,红细胞裂解后富集单个核细胞,配制含1×106个细胞的悬液;取对数生长期肾肿瘤细胞,配制成每管分别含500、200、100、50、10个肿瘤细胞的悬液,与1×106个单个核细胞混合,建立肾癌外周血CTCs模型,AO-F染色后计算肿瘤细胞回收率;另计算2组外周血AO-F+细胞的检出率,分析其与患者临床参数之间的关系。结果肾癌原代肿瘤细胞和细胞系769-P均呈现出鲜明色彩,两者具有相似的形态学特征,平均每个视野下AO-F+细胞占肿瘤细胞的比例为93
作者:刘敏;马富玲;韩荣;李美;刘淑芬;张淑敏
来源:天津医药 2015 年 7期